不同区域普洱茶晒青毛茶的分子鉴别方法

摘要

本发明公开一种不同区域普洱茶晒青毛茶的分子鉴别方法，属分子标记技术领域。该方法由样本DNA的提取、选择接头和预扩引物、AFLP引物筛选、AFLP扩增、AFLP－毛细管电泳检测、数据处理和分析六个步骤组成。AFLP引物为E－AAC/M－CTG和E－AAC/M－CTA两对扩增多态性最高的引物。选择性扩增样本检测在CEQ8000遗传分析系统上完成，电压为6KV。本发明的一对引物可扩增出200多个位点，位点差异在1bp都能检测到；建立了西双版纳老班章、临沧勐库、普洱景迈等9个著名古茶园的AFLP标准图谱，据此能鉴别不同区域的普洱茶晒青毛茶、著名古茶园普洱茶的真伪，为普洱茶原产地保护提供了技术保障。

主权项

1、一种不同区域普洱茶晒青毛茶的分子鉴别方法，由样本DNA的提取、选择接头和预扩引物、AFLP引物筛选、AFLP扩增、AFLP-毛细管电泳检测、数据处理和分析六个步骤组成，其特征在于：(1)在AFLP引物筛选中，筛选出E-AAC/M-CTG和E-AAC/M-CTA两对扩增多态性最高的引物，用于AFLP分析，其序列如下，E-AAC：5’-GACTGCGTACCAATTCAAC-3’M-CTG：5’-GATGAGTCCTGAGTAACTG-3’M-CTA：5’-GATGAGTCCTGAGTAACTA-3’；(2)在AFLP-毛细管电泳检测中，选择性扩增样本检测在CEQ8000遗传分析系统上完成；其上样液：甲酰胺10ul，Size standard-600 0.2ul，稀释10倍的Sample 3ul；电压：6KV，电流：4Ma，时间：50min；其扩增产物在高分辨率毛细管中电泳分离，激光激发荧光采集数据，电泳结果通过软件自动统计分析并转化为“0、1”原始数据矩阵备用；同时，导出电泳分离图谱。