| 摘要 |
1. Способ зондирования нескольких мишеней в биологическом образце, включающий следующие стадии:(а) образец подвергают реакции гибридизации in situ, используя меченый нуклеиново-кислотный зонд, который прямо или опосредовано связывается с РНК-мишенью;(б) наблюдают сигнал от меченого зонда, связанного с РНК-мишенью;(в) возможно удаляют сигнал от меченого зонда;(г) образец подвергают протоколу демаскировки антигенов для демаскировки белковых эпитопов в образце;(д) образец подвергают реакции гибридизации in situ, используя способ, основанный на антителах, и присоединяют один или более антительных зондов к антигенам на образце;(е) наблюдают сигнал от одного или более антительных зондов;(ж) удаляют сигнал от антительных зондов;(з) возможно используют обработку протеазой для получения доступа к ДНК-мишеням образца;(и) образец подвергают реакции гибридизации in situ, используя меченый нуклеиново-кислотный зонд, чтобы прямо или опосредовано пометить одну или более ДНК-мишеней образца;(к) наблюдают сигнал от меченых ДНК-мишеней;(л) возможно удаляют сигнал от одной или более меченых ДНК-мишеней.2. Способ по п. 1, где стадия (а) дополнительно включает стадию предварительной гибридизации для блокирования ДНК, использование блокирующего агента в реакции гибридизации или их комбинацию.3. Способ по п. 1, где после наблюдения сигнала от меченого зонда, связанного с РНК-мишенью, образец подвергается стадии (в) и стадии (а), (б) и (в) повторяют один или более раз с другими мечеными нуклеиново-кислотными зондами для разных РНК-мишеней.4. Способ по п. 1, где реакция гибридизации in situ с использованием метода, основанного на антителах, включает иммуногистохимические (IHC) или иммунофлуоресцентные (IF) |
