| 主权项 |
1﹒具有促进人类骨髓细胞分化及增殖成嗜中性白血球之能力的集落刺激因子(CSF),其具有下列化性质:i)分子量:藉十二烷基硫酸钠一聚丙烯醯胺胶电泳法所测定之分子量为19,000土1,000ii)等电点:具有表1所示三种等电点(A,B及C)之至少其中一种:(iii)UV吸收度:于280Onm下有最大吸收度,于250Onm下则有量小吸收度;(iv)下列21个胺基酸系由N端排列:H2-THr-PrO-Leu-GLy-Pro-Ala-Ser-Ser(10)-Leu-Pro-Gly-(ser)Phe-Leu-Leu-Lys-X Leu-(20)Glu-X-Val-2﹒根据申请专利范围第1.项之CSF,其中等置点PI系为A。3﹒根据申请专利范围第1.项之CSF,其中等置点Pl系为B。4﹒根据申请专利范围第1.项之CSF,其中等电点PI系为C。5﹒获得具有下列生化性质之CSF之方法,该方法包括将兵有人类G-CSF制造能力之细胞系培养于无血清之培养溶液中,再令培养上层液进行下示(1)至(3)之步骤,并令所得之分级部份任意进行(4)或(5)之步骤:(1)使用具有5,000-70,000道尔吞之有效分级部份范围之胶以令上层培养液进行胶滤作用,再回收具有支配嗜中性白血球性集落刺激效力(CBA)之诸分级部份;(2)将已回收之诸分级部份吸附至载体上以逆相高功应色层分离作用,再使用水及有机溶剂之混合物以密度梯度技术法进行洗提作用以回收具有支配嗜中性白血球性(CSA)之诸分级分;(3)将已回收之诸分级部份进行高功应分子筛色层分离作用以回收具有支配嗜中性白血球性CSA之诸分级部;(4)将已回收之诸分级部份进行等电点电泳作用以回收具有支配嗜中性白血球性CSA之诸分级部份;或(5)令步骤(3)所回收之诸分级部份移去唾液酸以回收具有支配嗜中性白血球性CSA之诸分级部份;生化量质:(i)分子量:藉十二烷基硫酸钠-聚丙烯醯胺胶电泳法所测得之分子量为19,0001,000;ii)等电点:具有表1所示三种等电点之至少其中一种。图1iii)UA收收度于280nm下有最大吸收,于250nm下则为最小吸收;iv)下列21个胺基酸系由N端排列H2N -ThR-Pro-Lcu-Gly-Pro-Ala-Scr-Ser-(10)Leu-Pro-Gln-(Scr)-Phe-Lcu-Lcu-Lys-X-(20)Leu-Glu-X-Val-6﹒根据申请专利范围第5.项之方法,其中具有制造人类G一CSF能力之细胞系系为CHU-1。图2 |
