发明名称 人类淋巴球培养液之制造法,该培养液及其用途
摘要 本发明乃含有来源于人类血液之成长、分化促进因子,同时实质上不含有人类细胞增殖阻物质以及微生物的人类细胞培养用组成物和其用途有关者。
申请公布号 TW183227 申请公布日期 1992.05.01
申请号 TW078106730 申请日期 1989.08.31
申请人 制药股份有限公司;武田药品工业股份有限公司 发明人 土田哲雄;北内政弘;东野一弥;頩井清二郎
分类号 C12N5/08 主分类号 C12N5/08
代理机构 代理人 洪武雄 台北巿城中区武昌街一段六十四号八楼;陈灿晖 台北巿城中区武昌街一段六十四号八楼
主权项 1.一种人类淋巴球培养液之制造法,系实质上不含人类淋巴球增殖阻害物质及微生物,而其主要成分为以白蛋白为主成分之含有来自人类血液之成长、分化因子,而该淋巴球系供继承免疫疗法之用;包括下列之步骤:将人类血液置于经灭菌处理之容器,在10-30℃之温度静置约8-24小时,去除凝固之血饼而得液体之粗血清,将该粗血清以离心分离(约3,000-10,000rpm.约10-20分钟)收集其上澄液,而得人类血清;或,将人类血液置于含有防止血液凝固剂之灭菌容器,经振荡搅拌后以离心分离(约3,000-10,000rpm,约10-20分钟)收集其上澄液,而得人类血浆,或依须要,添加添加氯化钙于该人类血浆至其最终浓度为约20mM,再经离心分离(约3,000-10,000rpm,约10-20分钟)而得上澄液;i)使用0.3-2容量%之环氧乙烷作为不活化剂,于10-30℃处理1-3天为特征之微生物不活化工程,ii)以55-70%范围之硫酸铵处理为特征之盐析工程,以及,iii)使用透析膜进行透析之硫酸铵脱盐工程,iv)必要时利用超滤实施浓度调整,使蛋白浓度达约20-80mg/ml,v)利用滤膜实施除菌过滤。2.一种人类淋巴球之培养方法,系在继承免疫治疗法中培养人类淋巴球时,使用将如申请专利范围第1项之制造法所制得之培养液以及林巴细胞活素添加至人类淋巴球,用基础培养基中所成之培养基,以培养人类淋巴球,而使人类淋巴球增殖且活性化为特征者。
地址 日本