分析酵素中之加强信号的方法

摘要

分析存在于一液体中之未知酵素之一种方法，其包括藉着利用第二酵素及此第二酵素之一封阻调节剂（blocked modulator ） 之信号放大。在液体中的未知酵素从封阻调节剂中移去一个封阻基。所产生的调节剂活化或抑制第二酵素，此酵素催化一种指示剂反应，在反应中，基质经转化成产物。在液体中，未知酵素之存在与否，经由与指示剂反应相关之信号，例如颜色改变或颜色改变之速率，加以表示。样品中酵素之浓度可藉着信号之测量来决定。本发明包括有益于实行本发明方法之材料组套。

主权项

1﹒一种测定在液体中之酵素之方法,包括:(a)将怀疑含有糖或磷酸之液体和羧基酯及羧基酯之封阻过的抑制剂结合,该糖或磷酸将封阻过的氟酮抑制剂水解成氟酮抑制剂;(b)将该羧基酯之受质加入该液体中,该氟酮抑制受质被羧基酯水解成有色产物;其中受质系选自硝基苯酯及氧基酯;及(c)藉着侦检一与该有色产物相关联之信号来测定该糖或磷酸。2﹒如申请专利范围第1项之方法,其进一步包括测定该液体中之糖或磷酸之浓度,乃藉着测量该信号之大小,并且把它和一种与产物相关联之信号大小相比较,此时将含有该糖或磷酸预定量之液体样品重复进行步骤(a)至(c)。3﹒一种测定在液体中之酵素之方法,包括:(a)将怀疑含有糖或磷酸之第一液体与酯及酯之封阻过的氟酮抑制剂结合,该糖或磷酸将封阻过的氟酮抑制剂水解成氟酮抑制剂;(b)将色原加至该液体中,该氟酮抑制剂抑制色原被酯水解成有色产物;(c)计量抑制作用之大小;及(d)测定该液体中之糖或磷酸之浓度,系当将含有该糖或磷酸预定量之液体样品重复进行步骤(a)至(C)时,比较该大小与抑制形成有色产物之大小而定。4﹒一种进行糖或磷酸分析之物质组套,包括:-含有预定量糖或磷酸之液体;-羧基酯;-羧基酯之受质;及-羧基酯之封阻过的氟酮抑制剂,其中受质系选自硝基苯酯及氧基酯。5﹒如申请专利范围第4项之组套,其尚包括一本质上不含该糖或磷酸之液体样品。