发明名称 利用羟基磷灰石管柱纯化人尿中凝血调节素( thrombomodulin)之方法
摘要 本发明提供一种人尿中凝血调节素之纯化方法,其特征为:使含有人尿中凝血调节素之试料溶液经填充有羟基磷灰石之管柱在pH5至8条件下吸着凝血调节素,然后使用磷酸之梯度浓度洗提使被吸着之凝血调节素自羟基磷灰石解吸(desorption)。采用此简单操作可纯化人尿中之凝血调节素,且即使是纯化凝血调节素含量低之原料时,亦可纯化得比凝血调节素含量高之原料时还高之纯化倍率。
申请公布号 TW408129 申请公布日期 2000.10.11
申请号 TW085113059 申请日期 1996.10.24
申请人 化学研究股份有限公司 发明人 原淳一;浅田亚希;柴田梢;加藤和夫
分类号 C07K1/22 主分类号 C07K1/22
代理机构 代理人 陈灿晖 台北巿城中区武昌街一段六十四号八楼;洪武雄 台北巿城中区武昌街一段六十四号八楼
主权项 1.一种人尿中凝血调节素之纯化方法,其特征为:使含有人尿中凝血调节素之试料溶液控填充有羟基磷灰石之管柱在pH5至8条件下吸着凝血调节素,然后使用磷酸之梯度浓度洗提使被吸着之凝血调节素自羟基磷灰石解吸(desorption)。2.如申请专利范围第1项之方法,其中,含有凝血调节素之试料系人尿原液或其硫酸铵区分浓缩物,或经由阴离子交换层析或凝血结合之亲和性层析预先纯化处理者。3.如申请专利范围第1项之方法,系与离子交换层析,凝血结合之亲和性层析,以及胶滤层析等之至少一种以上之方法配合者。图式简单说明:第一图:于实施例1中,将含有人尿中凝血调节素之试料(Lot.1)经由羟基磷灰石吸着后,以磷酸钠直线梯度浓度洗提凝血调节素之溶离图。第二图:于实施例1中,使用Lot.2试料时依第一图同样方式操作之凝血调节素的溶离图。第三图:实施例1制得之人尿中凝血调节素纯化产物在还原及非还原条件下之SDS-聚丙烯醯胺电泳结果之照片,其中
地址 日本