| 主权项 |
1.制造DNA转移媒介之方法,其可用以维持及复制具有牛前生长荷尔蒙编码之去氧核脊数序列,此法之特点为使带有牛前生长荷尔蒙编码之去氧核酸序列与以限制 分裂转移媒介而制备得之DNA分子反应。2.根据上述请求专利部份第1.项之方法,其特点为带有牛前生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列包含带有如下序列之一正般:5'-ATG ATG GTC GCA GGCCCC CGG ACC TCC CTG CTC CTGGCT TTC GCC CTG CTC TGC CTGACC TGG ACT CAG GTG GTG GGCGCC TTC CCA GCC ATC TCC TTGTCCGGC CTG TTT GCC AAC GCTGTG CTC CGG GCT CAG CAC CTGCAC CAG CTG GCT GCT GAC ACCTTC AAAGAC TTT GAG CGT ACCTAC ATC CCG GAG GGA CAG AGATAC TCC ATC CAG AAC ACC CAGGTT GCC TTCTGC TTC TCC GAAACC ATC CCG GCC CCC ACG GGCAAG AAT GAG GCC CAG CAG AAATCA GAC TTG GAGCTG CTT CGCATC TCA CTG CTC CTC ATC CAGTCG TGG CTT GGG CCC CTG CAGTTT CTC AGC AGA GTCTTC ACCAAC AGC TTG GTG TTT GGC ACCTCG GAC CGT GTC TAT GAG AAGGTG AAG GAC CTG GAG GAAGGCATC TTG GCC CTG ATG CGG GAGCTG GAA GAT GGC ACC CCC CGGGCT GGG CAG ATC CTC AAG CAGACC TAT GAC AAA TTT GAC ACAAAC ATG CGC AGT GAC GAC GCGCTG CTC AAG AAC TAC GGT CTGCTC TCC TGC TTC CGG AAG GACCTG CAT AAG ACG GAG ACG TACCTG AGG GTC ATG AAG TGC CGCCGCTTC GGG GAG GCC AGC TGCGCC TTC TAG-3'其中A为去氧腺嘌吟基,G为去氧鸟粪嘌吟基,C为去氧胞嘧啶基,及T为胸腺嘧啶基。3.一方法,用以制备带有牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列,其可用以合成半生长荷尔蒙,此法之特点为分裂带有牛前生长荷尔蒙编码之cDNA(已根据上述请求专利部份第1.项之方法以限制 HaeII维持及复制),将分裂之产物与由包含下列各物之组中选出上酵素一起孵育:DNA聚合I之Klenow断片,T4 DNA聚合,或3'-5'外核酸 。4.根据上述请求专利部份第3.项之方法,特点为与该Klenow 断片一起孵育时系在dATP存在下进行,所得产物以S1核酸 消化,由此获得带有牛生长荷尔蒙胺基酸2-191 编码之去氧核 酸序列。5.根据上述请求专利部份第4项之方法,其特点为带有牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列包含带有如下序列之正股:5'-TTC CCA GCC ATC TCCTTG TCC GGC CTG TTT GCC AACGCT GTG CTC CGG GCT CAG CACCTG CAC CAG CTG GCT GCT GACACC TTC AAA GAG TTT GAG CGTACC TAC ATC CCG GAG GGA CAGAGA TAC TCC ATC CAG AAC ACCCAG GTT GCC TTC TGC TTC TCCGAA ACC ATC CCG GCC CCC ACGGGC AAG AAT GAG GCC CAG CAGAAA TCA GAC TTG GAG CTG CTTCGC ATC TCA CTG CTC CTC ATCCAG TCG TGG CTT GGG CCC CTGCAG TTT CTC AGC AGA GTC TTCACC AAC AGC UTG GTG TTT GGCACC TCG GCA CGT GTC TAT GAGAAG CTG AAG GAC CTG GAG GAAGGC ATC TTG GCC CTG ATG CGGGAG CTG GAA GAT GGC ACC CCCCGG GCT GGG CAG ATC CTC AAGCAG ACC TAT GAC AAA TTT GACACA AAC ATG CGC AGT GAC GACGCG CTG TCT AAG AAC TAC GGTCTG CTC TGG TGC TTC CGG AAGGAC CTG CAT AAG ACG GAG ACGPAC CTG AGG GTC ATG AAG TGCCGC CGC TTG GGG GAG GCC AGCTGT GCC TTC TAG -3'其中A为去氧腺嘌吟基,G为去氧鸟粪嘌吟基,C为去氧胞嘧啶基,及T为胸腺嘧啶基。6.根据上述请求专利部份第3项之方法,其特点为与Klenow 断片孵育时系在dATP ,dGTP dCTP及dTTP存在下进行。所得产物与由包括下列各物之组中选出之酵素于dCTP存在下一起孵育:Klenow 断片,T4DNA聚合 ,或3'-5'外核酸 。所得产物以S1核酸 消化,由此得带有有牛生长荷尔蒙胺基酸1-191编码之去氧核 酸序列。7.根据上述请求专利部份第6项之方法,其特点为带有牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列包含带有如下序列之一正股:5'-GCC TTC CCA GCC ATGTCC TTG TCC GGC CTG TTT GCCAAC GCT GTG CTC CGG GCT CAGCAC CTGCAC CAG CTG GCT GCTGAC ACC TTC AAA GAG TTT GAGCGT ACC TAC ATC CCG GAG GGAGAG AGA TACTCC ATC CAG AACACC CAG GTT GCC TTC TGC TTCTCC GAA ACC ATC CCG GCC CCCACG GGC AAG AATGAG GCC GAGCGA AAA TCA GAC TTC GAG CTTCGC ATC TCA CTG CTC CTC ATCCAG TCG TGG CTT GGGCCC CTGCAG TTT CTC AGC AGA GTC TTCACC AAC AGC TTG GTG TTT GGCACC TCG GAC CGT GTC TATGAGAAG CTG AAG GAC CTG GAG GAAGGC ATC TTG GCC CTG ATG CGGGAG CTG GAA GAT GGC AAC CCCGGG GCT GGG CAG ATC CTC AAGCAG ACC AAT GAC AAA TTT GACACA AAC ATG CGC AGT GAC GACGCG CTG CTC AAG AAC TAC GGTCTG CTC TCC TGC TTC CGG AAGGAC CTG CAT AAG ACG GAG ACGTACCTG AGG GTC ATG AAG TGCCGC CGC TTC GGG GAG GCC AGCTCT GCC TTC TAG-3'其中A为去氧腺嘌吟基,G为去氧鸟粪嘌吟基,C为去氧胞嘧啶基,及T为胸腺嘧啶基。8.根据上述请求专利部份第1.或2.项制造胞浆体pBP348之方法,其特点为以限制 分裂转移媒介所制备之DNA分子系pBR322,限制 为PstI。9.一方法用以制造DNA 转移媒介,其可用以维持及复制带有牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸弱列,此法之特点为使根据上述请求专利部份第3.至7.项任何一项制成之带有牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列与以限制 分裂转移媒介制备之DNA 分子反应。10.根据上述请求专利部份第1.2或9项制造表现转移媒介之方法,其可用以表现带有牛前生长荷尔蒙或牛生长荷尔蒙编码之圭氧核 酸序列,此法之特点为以限制 分裂转移媒介所制备得之DNA 分子系于可表现控制区内之一点分裂。11.一方法用以制造融合蛋白质,其中包含牛前生长荷尔蒙胺基酸序列或牛生长荷尔蒙胺基酸序列作C-终端,一部分原核蛋白质作N-终端;此法之特点为孵育以表现转移媒介变形之微生物(选自E.coli PRI,E.coliHB lOl,E.coli DP 5O SupF 及E.coli Xl776),该媒介系根据上述请求专利部份第10.项制备而包含带有该牛前生长荷尔蒙或该牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列。12.一方法用以合成牛生长荷尔蒙,其特点为孵育以表现转移媒介变形之微生物(选自E.coli PRI,E.coliHElO1,E.coli DP 5O,E.coliDP50 SuPF及E.coli X1776)该媒介系根据上述请求专利部份第3.至7.项任何一项制备而带有该牛生长荷尔蒙编码之去氧核 酸序列,孵育条件适于表现该牛生长荷尔蒙之序列编码;并由该微生物溶解物或培养基纯化牛生长荷尔蒙。 |
