一种抗齿叶矮化病水稻的育种方法

摘要

本发明公开一种抗齿叶矮化病水稻的育种方法，运用绿色防控技术，将不适于在江苏地区高产种植的水稻品种中的抗齿叶矮化病基因高效而专一地渗入江苏省优质水稻材料，缩短了育种周期，在一定程度上减少了水稻生产成本，做到了控害减损保产，降低化学农药用量，保障稻米质量安全和稻田生态环境，具有应用前景。

主权项

一种抗齿叶矮化病水稻的育种方法，其特征在于：所述一种抗齿叶矮化病水稻的育种方法所需种子材料包括，齿叶矮化病抗性水稻材料、江苏省优质水稻材料以及广亲和性粳稻材料；所述江苏省优质水稻材料为产量高、米质好、易感齿叶矮化病的育种主干品系，所述齿叶矮化病抗性水稻材料为高抗齿叶矮化病、在江苏省不高产、不适宜大规模推广的种系；具体步骤如下：(1)第一播种和移栽程序：将齿叶矮化病抗性水稻材料和广亲和系粳稻分别浸种于稀释的浸种液中，浸种1～2天后，催芽并按品种播种于实验秧田，单株移栽，株行距为30×30cm；一般大田肥水和病虫草害管理，至植株正常生长到扬花期，进行步骤(2)；(2)杂交种F1的获取：将母本植株的稻穗浸入39～46℃的温水中，浸泡6～10分钟后取出，自然冷却30分钟，剪去l/3颖壳及未开颖的小花，用纸袋将母本植株的稻穗套好并作标记，待用；当父本植株进入开花期时，将父本植株上稻穗的花药均匀落到纸袋中母本植株稻穗的柱头上，人工授粉完成后将纸袋继续套好，等待杂交稻穗的籽粒成熟，即获得杂交种F1；(3)杂交种F1抗齿叶矮化病的褐飞虱筛选：杂交种F1正季播种，当杂交种F1处于2～2.5叶期时，按每株水稻10～20头的数量向秧田释放褐飞虱，50天后对每株水稻进行评估，保留未受齿叶矮化病侵害的植株；所述褐飞虱每头饲喂水稻齿叶矮化病毒粗毒素提取液4～5天，全部携带水稻齿叶矮化病毒；(4)杂交种F1的花药愈伤诱导：以稻穗中部花药位置占颖壳的1/2为标准取穗，取穗后用70％乙醇表面消毒，然后用塑料薄膜包住整个稻穗，保持稻穗湿润放入冰箱中，在4℃下低温预处理3天；剪去l/3颖壳及未开颖的小花，在85％的酒精中消毒处理2～10分钟，晾干后用剪开花药上部，将花药置于第一培养基中，进行诱导培养，在22～28℃下暗培养2～3天后，转移至第二培养基中，于25～29℃、光周期16h7500lx光照8h黑暗下进行继代培养，50天后将获得的杂交种F1的花药愈伤组织，统计花药愈伤组织诱导率，若花药愈伤组织诱导率低于5％，则需将杂交种F1与齿叶矮化病抗性水稻材料亲本回交直至花药愈伤组织诱导率高于5％；(5)第二播种和移栽程序：将江苏省优质水稻材料和杂交种F1分别浸种于稀释的浸种液中，浸种1‑2天后，催芽并按品种播种于实验秧田，单株移栽，株行距为30×30cm；一般大田肥水和病虫草害管理，至植株正常生长到扬花期，进行步骤(6)；所述浸种液同步骤(1)；(6)三交F1杂交种的获取：将母本植株的稻穗浸入39～46℃的温水中，浸泡6～10分钟后取出，自然冷却30分钟，剪去l/3颖壳及未开颖的小花，用纸袋将母本植株的稻穗套好并作标记，待用；当父本植株进入开花期时，将父本植株上稻穗的花药均匀落到纸袋中母本植株稻穗的柱头上，人工授粉完成后将纸袋继续套好，等待杂交稻穗的籽粒成熟，即获得三交F1杂交种；(7)三交F1杂交种抗齿叶矮化病的褐飞虱筛选：三交F1杂交种正季播种，当三交F1杂交种处于2～2.5叶期时，按每株水稻10～20头的数量向秧田释放褐飞虱，50天后对每株水稻进行评估，保留未受齿叶矮化病侵害的植株；所述褐飞虱每头饲喂水稻齿叶矮化病毒粗毒素提取液4～5天，全部携带水稻齿叶矮化病毒；(8)三交F1杂交种的花药愈伤诱导：以稻穗中部花药位置占颖壳的1/2为标准取穗，取穗后用70％乙醇表面消毒，然后用塑料薄膜包住整个稻穗，保持稻穗湿润放入冰箱中，在4℃下低温预处理3天；剪去l/3颖壳及未开颖的小花，在85％的酒精中消毒处理2～10分钟，晾干后用剪开花药上部，将花药置于第一培养基中，进行诱导培养，在22～28℃下暗培养2～3天后，转移至第二培养基中，于25～29℃、光周期16h7500lx光照8h黑暗下进行继代培养，获得花药愈伤组织，继续培养出花培苗、育苗、移植到大田，等待稻穗籽粒成熟，通过筛选即获得齿叶矮化病抗性水稻。