摘要 |
Способ получения ростовой добавки на основе лизата тромбоцитов (ЛТ) из тромбоцитарной массы (ТМ) доноров к среде для наращивания клеточной массы стволовых, прогениторных, дифференцированных и опухолевых клеток человека, включающий в себя нормирование образца ТМ до заданной концентрации тромбоцитов (1,75×10тромбоцитов/мл) путем центрифугирования ТМ при 3130g в течение 40 минут при 20°C и ресуспендировании осадка в супернатанте заданного объема до концентрации тромбоцитов 1,75×10тромбоцитов/мл, 3-х кратный температурный лизис тромбоцитов путем замораживания на сутки до -80°C и размораживания при +37°C, осаждение клеточного дебриса путем центрифугирования при 3130g, 40 минут, 20°C, сбор супернатанта, микроскопический контроль при увеличении ×200 на наличие в поле зрения не более 3-х фрагментов тромбоцитов, отличающийся тем, что стандартизацию лизата тромбоцитов проводят по функциональной активности в соответствии с математическими выкладками, для пулирования объединяют равные по объему образцы, полученные из тромбоцитарной массы не менее 12 доноров обеих гендерных групп, пулированный ЛТ центрифугируют при 3130g, 40 минут при 20°C, далее осуществляют ультрафильтацию пулированного образца на фильтрах 0,45 µкм или 0,22 µкм, после чего разливают по аликвотам требуемого объема и замораживают до -80°C до использования. |