UN METODO PARA PRODUCIR ISOPENICILINA N SINTETASA.

摘要

UN METODO PARA PRODUCIR ISOPENICILINA N SINTETASA. COMPRENDE: A) DIGERIR EL ADN DE UN FAGO RECOMBINANTE CON UN INSERTO DE ADN DE A. NIDULANS Y AISLAR UN FRAGMENTO DE ADN; B) INCUBAR EL MISMO CON PUC13 CON UNA ADN LIGASA; C) TRANSFORMAR UNA CELULA HUESPED CON LA MEZCLA Y AISLAR UN ADN PLASMIDICO CIRCULAR; D) DIGERIR PCIANH2 PRODUCIENDOSE UN FRAGMENTO DE ADN QUE INCLUYE PARTE DE LA SECUENCIA DE BASES DEL GEN DE LA ISOPENICILINA N SINTETASA; E) REANILLAR EL ADN CON OLIGONUCLEOTIDOS SINTETICOS COMPLEMENTARIOS OBTENIENDOSE UN ADAPTADOR QUE RECONSTRUYE LA SECUENCIA DE NUCLEOTIDOS NECESARIA; F) DIGERIR PIM-IIIAL Y MEZCLAR LOS FRAGMENTOS CON ADN LIGASA TRANSFORMANDO CELULAS CON LA MEZCLA, OBTENIENDOSE PIM-CIC; Y G) TRANSFORMAR CELULAS CON EL MISMO AISLANDOSE FINALMENTE ISOPENICILINA N SINTETASA. LA ISOPENICILINA N SINTETASA TIENE APLICACION EN LA BIOSINTESIS DE ANTIBIOTICOS LACTAMICOS.