Hybrid plasmid for producing subtilisin Carlsberg in bacillus.

摘要

Hybridplasmide für Mikroorganismen der Gattung Bacillus, enthaltend ein für Bacillus geeignetes Ausgangsplasmid mit einer oder mehreren Schnittstellen für Restriktionsenzyme wie Ava I und gewünschtenfalls einem Resistenzmarker sowie in das Ausgangsplasmid eingefügt eine isolierte doppelsträngige DNA enthaltend: - einen Promoter, der von der RNA-Polymerase von Mikroorganismen der Gattung Bacillus erkannt wird, - Ribosomenbindungsstellen - Startcodon - Strukturgen, das nur für Substilisin Carlsberg oder dessen Teilstücke mit proteolytischer Aktivität oder Varianten mit proteolytischer Aktivität einschließlich deren Leader-Sequenzen codiert - Stopcodon wobei vom Stopcodon abwärts gerechnet Oligonukleotidketten mit bis zu 400 Basenpaaren ohne spezifische Expressionsfähigkeit vorhanden sein können, dadurch gekennzeichnet, daß die eingefügte doppelsträngige DNA Promotor und Strukturgen von Subtilisin Carlsberg aus Bacillus licheniformis enthält und mit der Position -227, gerechnet vom Startcodon des Pro-/Pre-Subtilisins, beginnt.