自全酵母细胞回收蛋白质之方法

摘要

从酵母细胞回收蛋白质（例如酵素）的方法。将含有酵母细胞、水和少量有效的多氯脂肪族烃类之混合物，处理以适当的酸硷度、温度和时间，譬如置于室温十六至九十小时。最后分离出浮在表面似水的液体，含有很高的酵素活性。假如需要，酵素可以回收，典型的应用包括从脆壁克鲁维酵母回收乳糖酵素，从巴斯德毕亦酵母回收醇类氧化。典型的溶剂包括二氯甲烷，1，1，1－三氯乙烷和三氯甲烷。

主权项

1.一种从完整巴斯德毕赤酵母菌(PichiaPastoris) 及脆壁克鲁维酵母菌(Kluyveromyces fragilis)之酵母细胞回收酵素之方法,包括:(a)形成pH经调妥之该酵母细胞含水混合物,其包括酵素及主要大量的水溶液和少许有效量之液态多氯脂肪族烃处理剂,该处理系选择自:三氯甲烷;1 ,1 ,1-三氯乙烷;及二氯甲烷,或以上两种或两种以上的混合;又其中该酸硷度约为6.5至8.5,其中该掺合物含大约 0.8至 6体积百分比的处理剂;(b)该混合物在大约摄氏20至35之温度,酸硷度约 6.5至 8.5培育16至90小时,从而至少有一部份的酵素由细胞中释放至水中,形成含酵素的水液,和(c)分离液体和固体物质,其中液体含有酵素;其中自毕赤酵母菌属回收之酵素为酵类氧化 ,自克鲁维酵母菌属回收者为半乳糖 。2.根据申请专利范围第 1项之法,其中该保温培育温度约是摄氏25至35度,时间约是24至48小时。