发明名称 七叶树组织培养产生生育酚的方法
摘要 本发明提供了一种七叶树组织培养及制备生育酚的方法,在含有萘乙酸、激动素的MS培养基上进行愈伤组织诱导,在含有萘乙酸、吲哚丁酸和激动素的MS培养基上进行愈伤组织繁殖,通过层析柱从愈伤组织的石油醚浸出物中制备出生育酚。
申请公布号 CN1049520A 申请公布日期 1991.02.27
申请号 CN90108014.4 申请日期 1990.10.08
申请人 中国科学院植物研究所 发明人 胡昌序;巩志忠
分类号 C12P17/06 主分类号 C12P17/06
代理机构 代理人
主权项 1、一种通过七叶树组织培养制备生育酚的方法,包括: a.将未成熟果实的子叶或果皮接种于含有1ppm萘乙酸、0.5ppm激动素、3%蔗糖和0.6%琼脂的MS培养基上,进行愈伤组织诱导; b.将诱导所产生的愈伤组织转到含有1ppm萘乙酸、2ppm吲哚丁酸、0.5ppm激动素、500mg/l酪蛋白水解物、3%蔗糖和0.6%琼脂的MS培养基上进行愈伤组织繁殖,每3周继代1次; c.将上述固体培养的愈伤组织取出后,立即放入-20℃冰柜中,冰冻后置冰冻干燥机上干燥; d.取干燥后的愈伤组织,加10倍量的石油醚,于组织捣碎机内破碎,倒入三角瓶内,置暗处浸泡24小时,过滤,在氮气保护下,遮光,于70-80℃水浴锅上回收石油醚,蒸干后加少许正己烷溶解,待用; e.用正己烷湿法装柱,将脱活中性氧化铝装入带筛板的层析柱中,加上上述正己烷溶解物后,先用70-90ml正己烷洗脱,再用7%的乙醚正己烷洗脱,并收集前70-100ml洗脱液,在氮气保护下,遮光蒸干。
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