主权项 |
1、一种通过七叶树组织培养制备生育酚的方法,包括: a.将未成熟果实的子叶或果皮接种于含有1ppm萘乙酸、0.5ppm激动素、3%蔗糖和0.6%琼脂的MS培养基上,进行愈伤组织诱导; b.将诱导所产生的愈伤组织转到含有1ppm萘乙酸、2ppm吲哚丁酸、0.5ppm激动素、500mg/l酪蛋白水解物、3%蔗糖和0.6%琼脂的MS培养基上进行愈伤组织繁殖,每3周继代1次; c.将上述固体培养的愈伤组织取出后,立即放入-20℃冰柜中,冰冻后置冰冻干燥机上干燥; d.取干燥后的愈伤组织,加10倍量的石油醚,于组织捣碎机内破碎,倒入三角瓶内,置暗处浸泡24小时,过滤,在氮气保护下,遮光,于70-80℃水浴锅上回收石油醚,蒸干后加少许正己烷溶解,待用; e.用正己烷湿法装柱,将脱活中性氧化铝装入带筛板的层析柱中,加上上述正己烷溶解物后,先用70-90ml正己烷洗脱,再用7%的乙醚正己烷洗脱,并收集前70-100ml洗脱液,在氮气保护下,遮光蒸干。 |