主权项 |
1.以生物技术制造下式(I)所示L(一)-氯化肉毒硷之制法:包含:(a)令下式(Ⅱ)所示消旋性(R,S)-3,4-环氧丁酸酯(其中,R代表C1-C10烷基,或 基),与选自包括胰脂 、胰 、取自Candida Cylindracea的脂 之酵素反应,其量为消旋性酯的0.03%和10%重量之间,可以不对称和盛行方式,在5和60℃间之温度范围,于使用硷性缓冲溶液或矿物硷控制下的pH値5-9,将对映体S(一)水解,并依习用技术,自实质上以R(+)型存在的末反应酯(Ⅱ)分离对映体S(一);(b)令所得酯(Ⅱ)之该R(+)型,在使用硷性缓冲溶液或矿物硷控制下的pH値5-10,于10-40℃温度范围,与选自包括Subtilisina BPN',SubtilisinaCarlsborg,Alcalast 。可将该R(+)型大量水解的水解酵素,其量为酯R(+)的0.5和30%重量之间反应,直至得下式(Ⅲ)所示3,4-环氧丁酸盐,实质上呈R(+)型:(其中X=Na,K,Li);和(c)令式(Ⅲ)所示盐之该R(+)型,与浓度0.1-5.5莫耳/公升的三甲胺水溶液,依照草耳比在约1.5-3莫耳/莫耳之R(+)-3,4-环氧丁酸(Ⅲ)盐,在10-60℃温度反应,且利用HCl除去过量三甲胺得,得式(I)之L(一)一氯化肉毒硷者。2.如申请专利范围第1项之制法,其特征为,在式(Ⅱ)所示消旋性酯的非对称性水解中,所用微生物制成之酵素,其系选自包括Pseudomonas Fragi(IFO 3458),Bacillussubtilis(ATCC6633),Rodotorula minta(IFO 0879),Candida Cylindracea(ATCC 14830),Arthrohactersimplcx(IFO 3530)者。3.如申请专利范围第1项之制法,其特征为,消旋性酯(Ⅱ)在非对称性水解的混合物内浓度,在约1%和20%重量之间者。4.如申请专利范围第1项之制法,其特征为,式(Ⅱ)所示呈R(+)型之酯在水解混合物内之浓度,在约1%和20%重量 |