发明名称 | 一种microRNA‑133a的快速检测方法 | ||
摘要 | 本发明涉及一种microRNA‑133a的快速检测方法,属于生物检测技术领域,该microRNA‑133a的快速检测方法根据待测靶标microRNA‑133a的序列设计出与其完全互补的单链DNA序列,而后在单链DNA序列两端分别修饰荧光基团和荧光淬灭基团,从而获得与待测靶标microRNA‑133a相对应的Taqman探针,而后将患者血清、RNase‑free水、DSN酶、Taqman探针和RNA酶抑制剂按照一定的比例在特定的条件下进行反应,在激光的激发作用下,检测出反应液的荧光强度,即得到待测靶标microRNA‑133a的检测结果,该检测方法大大缩短了心肌损伤标志物microRNA‑133a的检测时间,在保证检测质量的基础上,提高了检测效率。 | ||
申请公布号 | CN106119374A | 申请公布日期 | 2016.11.16 |
申请号 | CN201610525106.2 | 申请日期 | 2016.07.05 |
申请人 | 徐州医学院附属医院 | 发明人 | 顾兵;张婷 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人 | 袁粉兰 |
主权项 | 一种microRNA‑133a的快速检测方法,其特征在于,包括:备料:准备好患者血清、RNase‑free水、浓度为18uM/uL的RNA酶抑制剂以及浓度为0.18uM/uL的DSN酶;设计探针:根据待测靶标microRNA‑133a的序列设计出与其完全互补的单链DNA序列,而后在所述单链DNA序列两端分别修饰荧光基团和荧光淬灭基团,获得浓度为200nmol/uL的Taqman探针;反应:将所述患者血清、所述RNase‑free水、所述DSN酶、所述Taqman探针和所述RNA酶抑制剂按照100:278:2:20:1的配比进行混合,在85℃的反应温度下反应25分钟;检测:根据相应Taqman探针设置反应所需的激发波长和发射波长,使用全自动酶标仪检测反应步骤中的反应液的荧光强度,即得到所述患者血清中的microRNA‑133a的检测结果;其中,与所述microRNA‑133a完全互补的单链DNA序列为:CAG CTG GTT GAA GGG GAC CAAA。 | ||
地址 | 221002 江苏省徐州市淮海西路99号 |