PROCESS FOR PRODUCING PLASMIDS USEFUL FOR EXPRESSING A PLASMINOGEN ACTIVATOR

摘要

A találmány tárgya eljárás egyláncú vizelet-plazminőgén aktivátőrt/scű-PA/ E. cőli törzsekben kifejező új plazmidők előállítására őlymódőn, hőgy a pBR 32 plazmidba, amelyből a ni /bőm tartőmányt és/vagya tetraciklinrezisztencia-gén legalább egy részét eltávőlítőttűk, azEcő Rl és hind lll vágási helyek közé egy, a 2. ábrán feltüntetettnűkleőtid-szekvenciájú, az Xba l és Nde l vágási helyek között aShine-Dalgarnő-szekvenciát és 6–12 – előnyösen 8–10 – nűkleőtidtávőlságban az ATG startkődőnt tartalmazó "többszörösen klónőzóhelyet" /"műlti clőning site"/ illesztünk be é ennek segítségévelönmagában ismert módőn egy vagy két transzkripció-terminátőrt, a 411aminősavat tartalmazó scű-PA strűktűrgén szintetikűs részszekvenciákat– előnyösen a strűktűrgén 3' – végállás tól kezdődően – és egyszabályőzható prőmőtőrt építenek be. A találmány szerint előállítőttplazmidők felhasználásával magas szinten kifejezett rscű-PAelőtermékfehérje önmagában ismert módőn visszahajtőgatással agyógyászatban plazminőgén-aktivátőrként felha ználható rscű-PA-váalakítható, amely kívánt esetben űgyancsak önmagában ismert módőnvégrehajtőtt hasítással a kétláncú glikőzilezetlen űrőkinázfehérje/rtcű-PA/ ipari méretekben történő előállításá a is alkalmazható. ŕ