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Un método in vitro para reducir la interferencia de la antitrombina III (AT-III) en un inmunoensayo para cuantificar a la trombina en una muestra en la presencia de antitrombina III (AT-III), donde el inmunoensayo comprende a los pasos de: contactar a la muestra con una molécula pequeña seleccionada de un grupo que consiste de hirudina, que ocurre naturalmente, variaciones de hirudina sintética, derivados de hirudina, variaciones recombinantes de hirudina, miméticos, y una de sus combinaciones, que reconocen el lugar de enlace de sustratos de la trombina; agregar a la muestra un anticuerpo policlonal específico de la trombina o uno de sus fragmentos, donde el anticuerpo específico de trombina es generado en contra de una trombina que tiene a un lugar activo bloqueado mediante una molécula seleccionada de un grupo que consiste de Phe-Pro-Arg-clorometilcetona (PPACK - Phe-Pro-Arg-chloromethylketone), ácido 4- aminofenilpirúvico (APPA - aminophenylpyruvic acid), fluoruro de bencenosulfonilo de 4-(2-aminoetilo) (AEBSF - 4-(2-aminoethyl ) benzenesulfonyl fluoride), y una de sus combinaciones; que comprende además a (a) medir el enlace del anticuerpo en relación a la trombina y determinar el monto de trombina presente; o (b) medir el nivel de anticuerpos enlazados, Donde el índice molar entre la hirudina y la trombina en esta muestra es mayor o igual que 0.64, Donde la interferencia de la antitrombina-III en el inmunoensayo es reducida en comparación a un inmunoensayo de control realizado en la ausencia de la molécula pequeña. |
