发明名称 使用突变DNA聚合酶的高温逆转录
摘要 本发明涉及使用热稳定DNA聚合酶的改进逆转录方法,特别是在镁离子缓冲液中。这些方法在合并逆转录/扩增反应中特别有用。
申请公布号 CN1344802A 申请公布日期 2002.04.17
申请号 CN01117024.7 申请日期 2001.04.18
申请人 霍夫曼-拉罗奇有限公司 发明人 E·S·史密斯;C·M·埃尔夫斯特伦;D·H·格尔范德;R·G·希古赤;T·W·麦尔斯;N·J·索恩布伦纳;A·M·王
分类号 C12P19/34 主分类号 C12P19/34
代理机构 中国专利代理(香港)有限公司 代理人 张广育;谭明胜
主权项 1.逆转录RNA的方法,包括:(a)提供含有所述RNA、引物、二价阳离子和突变热活性DNA聚合酶的逆转录反应混合物,其中所述突变DNA聚合酶的特征在于i)该DNA聚合酶的天然形式中包含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列;ii)与天然序列相比,所述氨基酸序列中4位氨基酸突变成除E、A、G或P之外的氨基酸;和(b)在足以使所述突变DNA聚合酶起始所述引物的延伸产物合成的温度下处理所述反应混合物,以提供与所述RNA互补的cDNA分子。
地址 瑞士巴塞尔