发明名称 |
使用突变DNA聚合酶的高温逆转录 |
摘要 |
本发明涉及使用热稳定DNA聚合酶的改进逆转录方法,特别是在镁离子缓冲液中。这些方法在合并逆转录/扩增反应中特别有用。 |
申请公布号 |
CN1344802A |
申请公布日期 |
2002.04.17 |
申请号 |
CN01117024.7 |
申请日期 |
2001.04.18 |
申请人 |
霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
发明人 |
E·S·史密斯;C·M·埃尔夫斯特伦;D·H·格尔范德;R·G·希古赤;T·W·麦尔斯;N·J·索恩布伦纳;A·M·王 |
分类号 |
C12P19/34 |
主分类号 |
C12P19/34 |
代理机构 |
中国专利代理(香港)有限公司 |
代理人 |
张广育;谭明胜 |
主权项 |
1.逆转录RNA的方法,包括:(a)提供含有所述RNA、引物、二价阳离子和突变热活性DNA聚合酶的逆转录反应混合物,其中所述突变DNA聚合酶的特征在于i)该DNA聚合酶的天然形式中包含有SEQ ID NO:1的氨基酸序列;ii)与天然序列相比,所述氨基酸序列中4位氨基酸突变成除E、A、G或P之外的氨基酸;和(b)在足以使所述突变DNA聚合酶起始所述引物的延伸产物合成的温度下处理所述反应混合物,以提供与所述RNA互补的cDNA分子。 |
地址 |
瑞士巴塞尔 |