利用混合诱导子茉莉酸甲酯和硫代硫酸银提高长春花悬浮细胞中二岐洼蕾碱的含量的方法

摘要

本发明涉及茉莉酸甲酯和硫代硫酸银作为混合诱导子，协同促进长春花悬浮细胞合成二岐洼蕾碱。长春花细胞在B5+IAA_0.5+6-BA_1.0培养基中，在25℃条件下，光照培养12天后，加入混合诱导子茉莉酸甲酯和硫代硫酸银，在同样的培养条件下继续培养1-7天后采收，从培养物中提取生物碱，利用HPLC法检测二岐洼蕾碱的含量变化。结果显示，在加入混合诱导子茉莉酸甲酯和硫代硫酸银后，能够显著地促进长春花悬浮细胞中的次级代谢产物生成二岐洼蕾碱，在第5天后，二岐洼蕾碱的含量达到最大值，为对照组的75.2倍。混合诱导子的诱导作用强于单独使用诱导子，说明茉莉酸甲酯和硫代硫酸银作为混合诱导子，有协调促进长春花细胞中的次级代谢产物合成二岐洼蕾碱的作用。

主权项

一种利用混合诱导子茉莉酸甲酯和硫代硫酸银提高长春花悬浮细胞培养物中二岐洼蕾碱含量的方法，其特征是长春花悬浮细胞按常规方法培养10‑15天，然后在培养液中加入茉莉酸甲酯和硫代硫酸银，加入茉莉酸甲酯的量为45‑180 μmol/L，硫代硫酸银的量为25‑100 mmol/L，继续培养1‑7天。