主权项 |
1.一方法用以产制包含下列各物之多接 合子多 (a)一胰岛素原之多 序列,包含人胰 岛素之A及B链,由至少2胺基酸 单位之桥链连接;该桥链各端皆有 允许自该A及B链间切除之部位; (b)额外蛋质;及 (c)邻近该额外蛋白质及该胰岛素原多 序列一端之分裂部位。 此方法包括下列步骤: (1)将带有该胰岛素原编码之基因插入 微生物分枝系媒体(其中该基因呈 读出相)带有该额外蛋白质及该分 裂部位编码之DNA序列; (2)将含有该插入基因之该分枝系媒体 变形微生物宿至供表现出该多接 合子多 ; (3)表现多接合子多 ;及 (4)分离经表现之多接合子多 。2.根据上述请求专 利部份第1.项之方法 ,其包含另一步骤,分裂该多接合子 多 以释出该胰岛素原。3.根据上述请求专利部份 第2.项之方法 ,其包含另一步骤,自该胰岛素原切 除该桥链。4.根据上述请求专利部份第3.项之方法 ,其中切除桥链之前于A及B链间形 成双硫链,而切除产物为人胰岛素。5.一方法用以 产制人胰岛素,包含(1)培 养一微生物变形体之培养物,其中含 有适于微生物宿主变形及于其中用以 表现出根据上述请求专利部份第1.项 之多接合子多 。(2)分离所得细胞块 ,(3)分离人胰岛素前驱,包含根据上 述请求专利部份第1.项之多接合子多 ,(4)自其中分裂额外蛋白质,(5)进 行A及B链之皱摺及联结,以及(6)切 除桥链。 |