一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组并行多重编辑载体及其应用

摘要

本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组并行多重编辑载体及其应用，酿酒酵母基因组并行多重编辑载体通过将Cas9蛋白表达框和多个sgRNA scaffold表达框整合在载体中，获得载体‑ Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以ADE1为靶位点设计合成的多条sgRNA片段整合到所述的载体‑ Cas9‑sgRNA scaffold中获得。本发明采用单质粒并单拷贝的载体系统，采用一个质粒同时表达Cas9蛋白和三个sgRNA scaffold，能够同时对三个靶基因进行编辑，使得多基因编辑工作变得非常简便，并且本发明的靶基因编辑系统只需一步构件和转化，操作简便。

主权项

一种基于CRISPR‑Cas9系统的酿酒酵母基因组并行多重编辑载体，其特征在于：所述的酿酒酵母基因组并行多重编辑载体通过将Cas9蛋白表达框和多个sgRNA scaffold表达框整合在载体中，获得载体‑ Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以ADE1为靶位点设计合成的多条sgRNA片段整合到所述的载体‑ Cas9‑sgRNA scaffold中得到所述的酿酒酵母基因组并行多重编辑载体。