发明名称 化学性发光分析法
摘要 一种化学性发光分析法,包括:在pH为4至10.5下,以酸式或硷式磷酸酯作为酵素,并以下列通式的二氧四圜(dioxetane)衍生物作为受质,进行催化反应,而后,在强硷条件下,进行发光反应,□ (Ⅰ)(式中R为低级烷基,而Ar为芳族基);及一种固相之化学光分析法,包括:在pH为4至10.5以下,以酸式或硷式磷酸酯作为酵素,以上述通式的二氧四圜衍生物作为受损,进行催化反应,而后,只有催化反应系统的固相,在硷性条件下,进行发光反应。该等方法可用于例如酵素免疫分析,以及聚核酸之测定方面。
申请公布号 TW156414 申请公布日期 1991.04.21
申请号 TW078104463 申请日期 1989.06.10
申请人 富士乐比奥股份有限公司 发明人 二宫忠司;矢野朗;冈田政久;橁原义弘
分类号 G01N 主分类号 G01N
代理机构 代理人 洪武雄 台北巿城中区武昌街一段六十四号八楼;陈灿晖 台北巿城中区武昌街一段六十四号八楼
主权项 1﹒一种化学性发光分析法,包括:在pH为7﹒5下,以硷式磷酸13作为酵素,以下列通式的二氧四圜(dioxetane)衍生物作为受质,进行13催化反应,而后,在强硷条件下,进行发光反应,(式中R为甲基,两Ar为苯基)。2﹒如申请专利范围第1项所述之方法,系用于TSH,AFP,CA125(癌标记),CA19─9(癌标记),CEA(癌胚抗原),ATLA(成人T细胞白血病抗原),或HIV(人类免疫缺陷病毒)之酵素免疫分析者。3﹒如申请专利范围第1项所述之方法,其中该发光反应系在DH为11至14间进行者。4﹒如申请专利范围第1项所述之方法,系用以测定HBSDNA者。5﹒如申请专利范围第1项至4项中之任一项所述之方法,其中该发光反应,系在加入停止剂使酵素催化反应停止后,在强硷下进行者。6﹒如申请专利范围第5项所述之方法,其中该停止剂为EDTA或酸。7﹒如申请专利范围第1项至4项中之任一项所述之方法,其中该反应在强硷下进行时,亦可含一种增进剂。8﹒如申请专利范围第7项所述之方法,其中该增进剂为哺乳类的血清白蛋白、聚烷基第四胺、萤光素及/或二甲基亚14。9﹒一种固相之化学性发光分析法,包括:在pH为7﹒5下,以硷式磷酸酯13作为酵素,以下列通式的二氧四圜(diohetans)衍生物作为受质,进行13催化反应,而后,只有酵素催化反应系统的固相,在强硷条件下,进行发光反应,(式中R为甲基,而Ar为苯基)。10﹒如申请专利范围第9项所述之方法,系用于TSH,AFP,CA125(癌标记),CA19─9(癌标记),CEA(癌胚抗原),ATLA(成人T细胞白血病抗原),或HIV(人类免疫缺陷病毒)之酵素免疫分析者。11﹒如申请专利范围第9项所述之方法,系用以测定HBSDNA者。12﹒如申请专利范围第9至11项中之任一项所述之方法,其中该发光反应,系在加入停止剂使酵素催化反应停止后,在强硷下进行者。13﹒如申请专利范围第12项所述之方法,其中该停止剂为EDTA或酸。14﹒如申请专利范围第9至11项中之任一项所述之方法,其中反应在强硷下进行时,亦可含一种增进剂。15﹒如申请专利范围第14项所述之方法,其中该增进剂为哺乳类的血清白蛋白、聚烷基第四胺、萤光聚及/或二甲基亚14。16﹒如申请专利范围第9项所述之方法,其中该固相为聚苯乙烯、聚氟乙烯、耐纶或聚缩醛。图示简单说明第1图说明发光对硷性条件的依存性第2图为发光轮廓图,系以酵素抑制剂使酵素催化反应停止以后,于硷性条件下,进行发光反应所得图形;第3图为发光轮廓图,系加酸使发光反应所得图形;第3图为发光轮廓图,系加酸使发光反应停止,而后在硷性条件下重新进行发光反应所得的图形;第4图为发光对时间的轮廓图,第5图为由TSH的化学发光EIA所得结果的图形,第6图为发光对pH的依存图形;第7图为洗涤频率对发的效应图;第8图为x一射线片子曝露在HBVS(人类B型肝炎病毒表面抗原]DNA(100微微克、10微微克、1微微克、0.1微微克),和经硷性磷酸酯42标示的寡核17酸DNA混成,并和AMPPD反应,且浸渍在1NNaOH溶液所产生的斑迹下,所得到的斑点相片(对照组系浸在0.1M EDTA溶液中)。
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