| 主权项 |
1﹒一种N,O─硫酸化肝素醣,其系由分子量介于1,500 及15,00 0Da间之链或链混合物所组成,其特征在于重覆的式 Ⅰ双醣结构:其中 :一E代表乙酯基,占该N,O─硫酸化肝素醣双醣单位 之0一80%, 及硫酸酯基团,且于其余双醣单位中可能是氢原子 ─G代表氢原子及硫酸 酯基,且其特征在于以硫酸酯/接基比率表示之硫 酸化作用程度,是介于 1﹒5及3﹒0之间及该N,O─硫酸化肝素糖之药学上可 接受之盐。 2﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其特征在于E代表乙 醯基或硫酸酯者。 3﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其保由分于量介于1 ,500及15,000Da间之链或链混合物所组成,其特征在于 重覆 的式Ⅰ双醣结构:其中:─E代表乙醯基,占该N,O─硫 酸化肝素醣双 醣单位之O一80%,及硫酸酯基及于其余双醣单位中 可能是氢原子,一 G代表氢原子及硫酸酯基,以硫酸酯/羧基比率表示 之硫酸化作用程度是 介于1﹒5至3﹒0之间,该N,O一硫酸化肝素醣之链二 端,还原或非 还原端,系糖醛酸基单位(硫酸化或其他),葡糖胺单 位(硫酸化或其他 ),或N一乙醯基葡糖胺单位(硫酸化或其他及该N,O─ 硫酸化肝素醣 之药学上可接受之盐类。 4﹒根据申请专利范围第1至3项中任一项之N,O─硫 酸化肝素醣,其特征 在于乙醯基之含量不超过60%。 5﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其特征在于含有至少 90%按重计分子量少于11,000Da之链。 6﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其特征在于含有少于 0﹒2微莫耳/毫克之胺基(NH2)。 7﹒根据申请专利范围第1项之N﹒O─硫酸化肝素醣 ,其保由平均分子量约 4,000Da至7,000Da之链所组成,该链之以硫酸酯/羧基比 率表示之硫酸化作用程度是介于1﹒7及3之间。 8﹒根据申请专利范围第1项之N﹒O─硫酸化肝素醣 ,其特征在于其系由至 少70%按重计分子量介于5,000及7,000Da间之链所组成, 其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用程度是 介于1﹒8及2﹒5之 间,且乙醯基之含量不超过20%。 9﹒根据申请专利范围第1项之N﹒O─硫酸化肝素醣 ,其特征在于其系由至 少70%按重计分子量介于10,000及12,000Da间之链所组 成,其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用程 度是介于1﹒8及2, 5之间,且乙醯基之含量不超过20%。 10﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣 ﹒其特征在于其系由 至少70%按重计分子量介于6,000及8,000Da间之链所组 成,其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用程 度是介于2﹒0及2 ﹒8之间,且乙醯基之含量不超过60%。 11﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其特征在于其系由 至少80%按重计分子量介于3,300及7,2O0Da间之链所组 成,其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用程 度是介于1﹒8及2 ﹒5之间,且乙醯基含量不超过20%。 12﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其特征在于其系由 至少80%按重计分子量介于3,300及7,700Da间之链所组 成,其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用程 度是介于1﹒8及2 ﹒5之间,且乙醯基之含量不超过20%。 13﹒根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣, 其特征在于其系由 至少70%按重升分子量介于6,900及13,500Da间之链所 组成,其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用 程度是介于18及2 ﹒5之间,且乙醯基含量不超过20%。 14﹒根据申请专利范围第1项之N﹒O─硫酸化肝素 醣,其特征在于其系由 至少80%按重计分子量介于4,000及10,300Da间之链所 组成,其中以硫酸酯/羧基比率表示之硫酸化作用 程度是介于2﹒0及 2﹒8之间,且乙醯基之含量不超过60%。 15﹒一种N,O─硫酸化肝素醣组成物,其特征在于其 含有至少70%按重 计根据申请专利范围第1项之N,O─硫酸化肝素醣。 16﹒一种制备含有70%─100%根据申请专利范围第1项 之N,O─硫 酸化肝素醣之组成物之方法,其特征在于其包括下 列顺序之步骤:a步 骤:掊养大肠杆菌(K5)株,其系SEBR3282菌株(寄存于法 国巴黎、巴斯德研究所之CNCM中,编号1─1013),或Bi6 26─42(012:K5:NM)ATCC23508,此培养在生 物团停止生长后再继续至少2小时,─b步骤:将形成 的N─乙醯基肝 素醣分离及纯化(事先或经由初步纯化)以得含有70 %─100%由 分子量介于1,500及15,000Da间之链或链混合物所组成 之 N─乙醯基肝素醣组成物,其特征在于重覆的式Ⅱ 双醣结构:此分离及 纯化,包括至少一次醇沈淀步骤及至少一次离子交 换层析步骤,─c步 骤:部份去醯化此N─乙醯基肝素醣组成物,以得含 有70%─100 %由分子量介于1,500及15,000Da之链或链混合物所组 成 之肝素醣组成物,其特征在于重覆的式Ⅲ双醣结构 :其中R'代表乙醯陛@ 礡A占双醣单位0─80%,及于其余双醣单位上之氢原 子,─d步骤﹛@ G一或此肝素醣组成物之部份N,O─硫酸化作用,─ 或此肝素醣组成炕@ 咫妊`驒陧AO─硫酸化作用,接以全部N─硫酸化作 用步骤,一或全部@ 〝帠`驒隃w硫酸化作用,接以全部或部份的O─硫酸 化作用步骤,及央@ 艩N地伴随于a、b、c或d步骤末了形成之分子团块 一次以上之分级丑@ 擢魖B骤。 17﹒根据申请专利范围第16项之方法,其特征在于N ─乙醯基肝素醣之分 离及纯化,系使用下列顺序步骤之方法所进行,─a1 步骤:乙醇沈淀 ,─b1步骤:透析,─c1步骤:乙醇沈淀,缀以脱水及乾 燥─d1 步骤:以阴离子交换层析纯化,─e1步骤:将d1步骤所 得溶离液之 乙醇沈淀,脱水、乾燥及碾磨,其中或a1或c1步骤之 一可省略。 18﹒根据申请专利范围第16项之方法,其特征在于N ─乙醯基肝素醣之分 离及纯化,系使用下列顺序步骤之方法所进行,─a' 1步骤:透析,╮@ wb'1,步骤:于酸性介质中纯化,于pH3﹒5及pH1﹒8之水 溶 液中除去不溶的杂质,─c'1步骤:乙醇沈淀,继以脱 水及乾燥,─╮@ 1步骤:硷水解及透析,─e'1步骤:以阴离子交换层 析纯化,─╮@ 1步骤:以排阻层析纯化。 19﹒根据申请专利范围第16项之方法,其特征在于 得自大肠杆菌(K5) 株培养物,于分离及纯化前接受初步纯化,系利用 下列顺序步骤之方法 所进行:─a"1步骤:离心培养末了所得之悬浮液,─b "1步骤:将 上清液与硷溶液接触,─c"1步骤:预过滤﹒─e"1步 骤:利用特定 截去阀値之膜浓缩,─e"1步骤:透析,其中e"1步骤可 省略。 20﹒根据申请专利范围第16项之方法,其特征在于 部份N,O─硫酸化作 用步骤后,进行全部的N─硫酸化作用,系以硫酸酐 与有机硷之复合物 于硷性pH之水性溶剂中进行。 21﹒根据申请专利范围第16项之方法,其特征在于 全部的N─硫酸化作用 步骤后将分子团块之分级。 22﹒一种抗凝血药学组成物,其含有根据申请专利 范围第l项之N,O一硫 酸化肝素醣为主要活性成份,与药学上可接受之惰 性赋形剂组合或混合 。 23﹒一种抗凝血药学组成物,其含有根据申请专利 范围第15项之N﹒O─ 硫酸化肝素醣组成物为主要活性成份,与药学上可 接受之惰性赋形剂组 合或混合。 24﹒根据申请专利范围第22或23项之药学组成物,其 可用于调控凝血作 用。 25﹒一种N─乙螺基肝素醣,其含有分子量介于1,500 及15,000 Da间之链混合物,其特征在于重覆的式Ⅱ双醣结构: 该N─乙醯基肝 素糖还原及非还原的二端系糖醛酸或N─乙醯基尔 糖胺单位。 26﹒根据申请专利范围第25项之N─乙醯基肝素醣, 其特征在于大部份链 之非还原端是式(a)之糖醛酸单位:27﹒一种可作为 中间产物之N ─乙醯基肝素醣组成物,其特征在于其含有至少70% 按重计之根据申 请专利范围第25项之N─乙醯基肝素醣。 28﹒一种肝素醣,其含有分子量介于1,500及15,000Da间 之链 混合物,其特征在于重覆的式Ⅲ双醣结构:其中R'代 表乙醯基,其占癒@ 钁玮璁鴗坎摃w80%,及于其余双醣单位中,其为氢原 子。 29﹒根据申请专利范围第28项之肝素醣,其特征在 于其乙醯基含量不超过 60%。 30﹒一种可作为中间产物之肝素醣组成物,其特征 在于其含有至少70%按 重计之根据申请专利范围第28及29项之肝素醣。 |
