发明名称 使用含磁性粒之乾化学剂来正确、快速、简单地进行血纤维蛋白原之分析(即测定在一样本中可凝成血块之血纤维
摘要 本发明揭示了一项进行血纤维蛋白原分析之装置及方法。反应片包含一个接受液体样本之反应槽,以及可与样本槽作流体流通之反应室。反应室包含一项乾试剂基质,其中嵌上许多磁性粒。加入样本槽之全血或由血液得到之样本,可立刻进入反应室,使该剂溶解,让磁性粒可自由移动,以振荡形式移动。以光学侦测此振荡形式,以测定样本中可凝血纤维蛋白原之浓度。
申请公布号 TW221493 申请公布日期 1994.03.01
申请号 TW079106328 申请日期 1990.07.31
申请人 心脏血管诊断公司 发明人 布鲁斯J.欧伯哈特;南希.葛瑞沙尔菲
分类号 C12M1/14;G01N33/50 主分类号 C12M1/14
代理机构 代理人 蔡坤财 台北巿松江路一四八号十二楼之三;恽轶群 台北巿松山区南京东路三段二四八号七楼
主权项 1﹒一种进行血纤维蛋白原分析之方法包括: (i)置于振荡磁场之反应片包括(1 )接受液体样本之样本槽及(2)含有乾 试剂基质之反应室,试剂基质上均匀散布 许多磁性粒,此处之试剂为蛋白,直接 执行或提高对血纤维蛋白原之作用,而且 引起血纤维蛋白原聚合; 样本槽及反应室经由几何图形之运送 区域,彼此以流体连通,使被放入样本槽 且体积对应该反应室体积之待分析液体样 本,系同时由该样晶体流入该反应槽; (ii)将全血或由血液得到之样本加到 该样本槽,藉此,让样本被同时引入反应 室,试剂被溶解,而在振荡磁场作用下, 该颗粒以振荡形式自由移动; (iii)光学侦测该反应室, 测定 (iiia)对应于相对于该振荡磁场之颗粒移 动政变程度之该血纤维蛋白原分析之起始 时间及停止时间或(iiib)该颗粒振荡之最 大振幅,A,以及接下来之残余后峰最小 振幅,B或(iiic)该颗粒振荡曲线之斜率 ,或A与B之间出该曲线所限定出来的面 (iv)使用该起始时间或该停止时间, 或至少E﹒或该斜率,或该面积,以测定 该样品中可凝血纤维蛋白原之浓度。 2﹒依据申请专利范围第1项之方法,其中该 试剂为可起始蛋白活化之凝血酵素,并 经由凝集连结反应使血纤维蛋白原聚合, 至少B或为该曲线所定义之面积被用来测 定样本中可凝血纤维蛋白原之浓度。 3﹒依据申请专利范围第1项之方法,此处之 该蛋白为,选自于由人的凝血酵素,牛 的凝血酵素,蛇毒凝血,铜斑蛇毒酵素 ,或马来半岛蝮蛇毒酵素所组成之族者。 4﹒一种进行可凝血纤维蛋白原分析之方法包 括: (i)将一反应片置于振荡磁场中,该 反应片包括(1)接受液也样本之样本槽(2)含有乾试 剂基质之反应室,试剂基 质上均匀散布许多磁性粒,其中该试剂为 从血纤维蛋白原分析试剂类所组成之族中 选择其中之一;该样本槽及反应室经由几 何图形之运送区域,彼此以流体连通,使 被放入样本槽并对应于该反应室体积之一 体积的待分析液体样本同时由该样本体流 入该反应槽; (ii)将全血或由血液得到之样本加入 该样本槽中,藉此,该样本被同时引入该 反应室,该试剂被溶解,而在该振荡磁场 作用下,该颗粒以振荡形式作自由移动; (iii)光学侦测该反应室,以测定对 应干相对该振荡磁场之颗粒移动改变程度 之血纤维蛋白原分析之起始时间及停止时 间;及 (iV)使用该起始时间及该停止时间, 测定该样本中可凝血纤维蛋白原之浓度。 5﹒依据申请专利范围第4项之方法,此处之 该乾试剂包括凝血酵素。 6﹒依据申请专利范围第4项之方法,此处之 该乾试剂包括蛇毒凝血、铜斑蛇毒酵素 马来半岛斑蝮蛇毒酵素。 7﹒一种进行血纤维蛋白原分析之方法包括: (i)将一反应片置于振荡磁场中,该 反应片包括(1)接受液体样本之样本槽 (a)反应室,及(3)该样本槽及该反 应室之间的导管,可以流体相互流通; 该反应室包括乾试剂基质,其上均匀 散布许多磁性粒,此处之该乾试剂基质只 存在该反应室中,该试剂是从分析血纤维 蛋白原的试剂类中,选择其中之一; (ii)将定体积之全血或由血得到之样 本加入该样本槽中,该定体积之该样本, 足以充满该导管,而不致进入该反应室, 或与该乾试剂基质接触; (iii)将定体积之缓冲稀释液加入该 样本槽中,该体积之该缓冲液须足以将该 样本洗至该反应室,藉此使该试剂被溶解 ,且在该振荡磁场影响下,让颗粒以振荡 形式自由移动; (iV)光学侦测该磁性粒之振荡,以测 定对应于相对于磁场之颗粒移动改变的程 度之血纤维蛋白原分析的起始时间及停止 时间;及 (V)利用起始时间及停止时间测定样 本中血纤椎蛋白原之浓度。 8﹒一种进行可凝血纤维蛋白原分析之方法包 (i)将一反应片置于振荡磁场中而反 应片包括(1)接受液体样本之样本槽( 2)含乾试剂基质之反应室,其上均匀散 布许多磁性粒,此处之该试剂为,血纤维 蛋白原分析之试剂类的其中之一; 该样本槽及反应室经由几何图形之运 送区域,彼此以流体连通,使被放入该样 本槽且对应于该反应室体积之一体积的待 分析液体,样本被同时由该样本槽送入该 反应格; (ii)将全血或由血液得到之样本加入 该样本槽,藉此该样本被同时引入该反应 室,该试剂被溶解,且经由振荡磁场作用 ,颗粒以振荡形式自由移动。 (iii)光学侦测该反应室,测定该颗 粒振荡之最大振幅,A,以及接下来之残 余后峰最小振幅,B;及 (iV)至少使用B以测定该样本中可凝 血纤维蛋白原之浓度。 9﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处利 用B来测定该样本中该血纤维蛋白原浓度。 10﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 利用比例A/B或B/A,测定该样本中 该血纤维蛋白原浓度。 11﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 利用A─B来测定该样本中该血纤维蛋白 原浓度。 12﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 利用(A─B)/A或A/(A─B)来 测定该样本中该血纤维蛋白原浓度。 13﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 利用A/B及(A─B)/A来测定该样 本中该血纤维蛋白原之浓度。 14﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 利用A与B 之间的可凝曲线之斜率来决 定该样本之血机维蛋白原浓度。 15﹒依据申请专利范围第8项之方法,其中 由A与B之间区域所界定之凝结曲线之上 或之下的面积或其一部份被用来决定该样 本的血纤维蛋白原浓度。 16﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 之该乾试剂包括凝血激素。 17﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 之该乾试剂包括凝血酵素。 18﹒依据申请专利范围第8项之方法,此处 之该乾试剂包蛇毒凝血、铜斑蛇毒酵素 或马来半岛斑蝮蛇毒酵素。 19﹒一种进行血纤维蛋白原分析之方法包括 (i)将一反应片置于振荡磁扬中该反 应片包含(1)接受液体样本之样本槽( 2)反应室,及(3)位于该样本槽及该 反应室之间的导管,可使两者之间流体互 相流通;该导管包含乾试剂基质,其中均 匀散布许多磁性粒,此处之该乾试剂只存 在该导管中,而此处之该试剂为血纤维蛋 白原分析试剂类所组成之族中选择其中之 一; (ii)将全血或由血液得到之样本加入 该样本槽,该样本之体积须足以充满该导 管及反应室,并与该试剂混合,将该试剂 洗入该反应室,藉此便在该振荡磁场影响 下,磁性粒可以振荡形式自由移动; (iv)光学侦测该反应室,测定(iva) 对应相对该磁场之一颗粒移动之变化程度 的该血纤维蛋白原分析之起始时间及停止 时间或(ivb)该颗粒振荡之最大振幅,A ,及接下来之残余,后峰最小振幅,B, 或(ivc)该颗粒振荡曲线之斜率或A与B 之间该曲线所定义之区域的面积;及 (v)利用该起始时间,让停止时间, 或最小B,或该斜率,或该面积,以测定 该样本中可血纤维蛋白原之浓度。 20﹒依据申请专利范围第19项之方法,在步 骤(ii)之前,将足以经由毛细作用为导管 所吸收定体积之蒸馏水加入该样本槽中, 藉此,便在力入该全血或该由血液得到之 样本之前,该乾试剂被溶解而且该磁性粒 可自由移动。 21﹒一种进行血纤维蛋白原分析之方法包括 (i)将全血或由血液得到之样本加入 反应片之样本槽,让反应片包含(1)接 受液体样本之该样本槽(2)反应室,及(3)位于该样本 槽及该反应室之间的导 管,可使两者之间流体互通; 该导管包括乾试剂基质,其中均匀散 布许多磁性粒,此处之该乾试剂基质只存 在该导管中,该试剂为血纤维蛋白原分析 试剂类所组成之族中,选择其中之一; 在此处加入该样本槽之定体积之该全 血或该由血液得到之样本,须足以充满该 导管及该反应室,并将该试剂沈入该反应 室中,使该磁性粒可自由移动; (ii)可在该全血或该由血液得到之样 本加入样本枯或稍微晚一些时,将该反应 片放入振荡磁场,其中该振荡磁场令使该 自由磁性颗粒以振荡形式移动;及 (iii)光学侦测该反应室测且(iiia) 该磁性粒振荡之后峙最小振幅, B,或 (iiib)该颗粒振荡之振幅之斜率, 或 (iiic)该颗粒振荡之最大振幅A及B之间 为曲线所定义之面积,以测定该样本中可 凝血纤维蛋白原之浓度。 22﹒一种进行血纤维蛋白原分析之乾试剂组 成包括磁性粒、蛋白、直接对血纤维蛋 白原作用或提高作用并引起血纤维蛋白原 聚合之辅因子。 23﹒依据申请专利范围第22项之乾试剂组成 ,此处之该乾试剂更进一步包括缓冲液、 多乙烯甘醇或牛血清蛋白。图示简单说明: 第1图为组合反应片之分解透视图, 可用来进行现有的,终点或动力学方法, 以测定血液或由血液得到之样本中,可凝 血纤维蛋白原之含量; 第2图为反应片及利用磁性粒测定反 应之装置的垂直纵截面图; 第3图为血纤维蛋白原分析之凝集曲 线,A为颗粒振荡之最大振幅,B为颗粒 振荡接下来之残余后峰之最少振幅; 第4图为动力凝集波形之详细特征, 可当作建立特定计算方法之系数以测定血 纤维蛋白原; 第5,6,7图为血纤维蛋白原分析 之计算分析基本特色之比较。
地址 美国
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