发明名称 IgG2型单抗二硫键配对分析方法
摘要 本发明公开一种IgG2型单抗二硫键配对分析方法,该方法包括步骤:1)、对蛋白质进行变性处理;2)、在非还原条件下使用特异性酶酶解变性处理后的蛋白质;3)、将酶解后的蛋白质分成两份样品,其中一份样品加入DTT进行还原,另一份样品不还原,两份样品均终止酶解;4)、对终止酶解后的样品的二硫键肽段进行质量肽谱图分析。本发明的方法可克服较为繁琐多种酶切处理方式,采用单一酶胰蛋白酶在非还原条件下酶解抗体蛋白,可以排除抗体蛋白特殊氨基酸序列对酶解蛋白时的空间位阻作用,能准确确认和定位二硫键肽段,并能检测到错配二硫键肽段。
申请公布号 CN106153746A 申请公布日期 2016.11.23
申请号 CN201510145272.5 申请日期 2015.03.31
申请人 三生国健药业(上海)股份有限公司 发明人 吕锋华;环民霞;刘周阳;谭青乔
分类号 G01N30/02(2006.01)I 主分类号 G01N30/02(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种蛋白质二硫键配对分析方法,依次包括如下步骤:1)、对蛋白质进行变性处理;2)、在非还原条件下使用特异性酶酶解变性处理后的蛋白质;3)、将酶解后的蛋白质分成两份样品,其中一份样品加入DTT进行还原,另一份样品不还原,两份样品均终止酶解;4)、对终止酶解后的样品的二硫键肽段进行质量肽谱图分析。
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