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l﹒一种制造一嵌合抗体分子之方法,此方法包括:(a)以一目标载体转移感染一抗浓制造细胞株,此目标载体包括:(i)一人类1免疫球蛋白恒定区,其系用来修饰一编码有由细胞株制造的的抗体之一部分之序列,以及(ii)一老鼠免疫球蛋白重链之恒定区,其同源于毗邻待修饰的抗体序列之第二DNA序列(secondDNAsequence) ,由此,人类1免疫球蛋白恒定区经由进行特定位体内同源重组而修饰抗体序列;以及(b)选捏制造嵌合抗组分子之转染体。2﹒如申请专利范围第l项所请之方法,其中,待修饰的抗体序列包括一恒定区基因,或其一部分。3﹒如申请专利范围第2项所谓之方法,其中,人类1免疫球蛋白恒定区编码有第二抗体恒定区或其一部分。4﹒如申请专利范围第2项所请之方法,其中,人类1免疫球蛋白恒定区编码有酵素,毒素,荷尔蒙,生长因子或连接子。5﹒如申请专利范围第1项所请之方法,其中,待修饰的抗体序列包括可变区基因,或其一部分。6﹒如申请专利范围第5项所话之方法,其中,人类1免疫球蛋白恒定区编码有第二抗体(secondantibody)可变区,或其一部分。7﹒如申请专利范围第1项所请之方法,其中,待修饰的抗体序列包括一重链基因。8﹒如申请专利范围第7项所请之方法,其中,老鼠免疫球蛋白重链之恒定区同源于V,D,J或接换(switch)区,或与毗邻被修饰的重链基因之插入序列(introns)同源。9﹒如申请专利范围第1项所请之方法,其中,待修饰的抗体序列包括一轻链基因。10﹒如申请专利范围第9项所话之方法,其中,老鼠免疫球蛋白重链之恒定区同源于V,D,J或区域,或与毗邻于待修饰的轻链基因之插入序列同源。11﹒一种制造一嵌合抗体之方法,此方法包括:(a)培据一嵌合抗边制造细胞株,其经由以一目标体转形感染一抗体制造细胞株而制得,此目标载体包括:(i)一人类l免疫球蛋白恒定区,其系用修饰一编码有由细胞株制造的抗体之一部分之序列,以及(ii)一老鼠免疫球蛋白重链之恒定区,其同源于毗邻待修饰的抗体序列之第二DNA序列同源;由此,人类l免疫球蛋白恒定区乃经由进行体内同源重组作用而修饰抗组序列,而且嵌合抗体经由被转化感染的细胞株表现;(b)从培养基中分离出嵌合抗体分子。12﹒如申请专利范围第l或11项所请之方法,其中,嵌合抗体分子包括一老鼠来源之可变区,以及一人类来源之恒定区。13﹒如申请专利范围第l或11项所请之方法,其中,嵌合抗体分子包括一连接一酵素,毒素,荷尔蒙,生长因子或连接子之恒定区。14﹒如申请专利范围第12项所请之方法,其中,待转移感染的抗体制造细胞株制造出单源抗体L6。15﹒如申请专利范围第13项所请之方法,其中,待转移感染的抗体制造细胞株制造出单源抗体L6。16﹒如申请专利范围第14项所请之方法,其中,抗体制造细胞株包括寄存于ATCC之HE8677。17﹒如申请专利范围第15项所请之方法,其中,抗体制造细胞株包括寄存于ATCC之HE8677。18﹒如申请专利范围第12项所请之方法,其中,待转移感染的抗体制造细胞株制造出单源抗体L2O。19﹒如申请专利范围第18项所请之方法,其中,抗体制造细胞株包括寄存于ATCC之HE8913。20﹒如申请专利范围第13项所请之方法,其中,待转移感染的抗体制造细胞株制造出单源抗体L2O。21﹒如申请专利范围第20项所请之方法,其中,抗体制造细胞株包括寄存于ATCC之HE 8913。图示简单说明:图1,表示一利用本发明目标载体经由同源重组之基因取代之一般化图表。图2,表示一目标载体PRSV-140-nRo/HuC-gammal /MuJ4 /e之构筑(construction)。图3,人类1gGI重组载体图。图4,用于标的 (target) 人类Cgammal序列之其它质体。 |
