一种发酵过程中添加亮氨酸生产γ‑聚谷氨酸的方法

摘要

本发明提供在本发明的一个方面，本发明提出了一种发酵过程中添加亮氨酸生产γ‑聚谷氨酸的方法，包括以下步骤：1）CGMCC3336 菌种的活化；2）种子液的制备：3)发酵罐发酵，并在发酵过程中添加不同浓度的亮氨酸。本发明生产γ‑聚谷氨酸，其γ‑聚谷氨酸的产量得到显著提高，该方法可以同时控制γ‑聚谷氨酸中L/D谷氨酸的比例，因此可以得到不同用途的γ‑ 聚谷氨酸。

主权项

一种发酵过程中添加亮氨酸生产γ‑聚谷氨酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）CGMCC3336 菌种的活化：在富含营养的固体培养基斜面上于 37℃培养 16 小时，制备得到成熟的斜面种子，固体培养基的成分包含：蛋白胨 10g/L，酵母粉 5g/L，NaCl10g/ L，琼脂 20g/L， pH7.2 ；2）种子液的制备 ：将一环上述种子转入装有液体种子培养基的三角瓶中，37℃，220rpm 培养16小时至对数生长期 ；其中，种 子 液 培 养 基 组 成（g/L）：葡萄糖 30 ；酵母膏 7 ；胰蛋白胨 10 ； 磷酸氢二钾0.5；硫酸镁0.5，pH7.2；500ml 的三角瓶中分装 50ml 培养基 ；3)发酵罐发酵：发酵罐培养基成分为（g/L）：葡萄糖 80，谷氨酸钠 80，硝酸铵 18，氯化钠10， 硫酸镁0.5， 氯化钙1.0， 硫酸亚铁0.01，精氨酸 0.44，组氨酸 0.26，苏氨酸 0.5， 蛋氨酸 0.4，谷氨酰胺 0.5，吡哆醇 0.001， pH7.2 ；发酵条件：5L 发酵罐装液量为 3L，种子液的接种量为10%，发酵温度 37℃，发酵中添加亮氨酸，通风量 1.0vvm，转速 400rpm，初始 pH 为7.2 。