发明名称 尿激素(UROKINASE)之净化及浓缩法
摘要
申请公布号 TW038906 申请公布日期 1981.09.01
申请号 TW06811333 申请日期 1979.06.19
申请人 艾尔发专利公司 发明人 ROBERT HAFELI
分类号 A61K37/24 主分类号 A61K37/24
代理机构 代理人 林敏生 台北巿南京东路二段一二五号七楼伟成第一大楼
主权项 1﹒一种用以获致具高浓度及高活性之尿激素之方法,从业经预先纯化之粗尿激素溶液始并依已知方法浓缩之,其中这尿激素液在─pH>6之介质内与一具高表面积一在其表面上系被共价化学键固定之aprotinin一之多乳固体基质接触,分离出载体介质,随后用pH<4﹒5之液洗离这被吸附之尿激素,继以多已知制法来制不同药品。2﹒一种根据请求专利部份第1项之方法,其中系于pH>6之介质内用一充有具高比表面积之多孔固体基质一在其表面上aprotinin被共价化学键固定一之柱行亲合性层析将组尿激素液分离,然后用pH<4﹒5之溶洗液以洗离此方式吸附之尿激素。3﹒一种根据请求专利部份第1和第2项之方法,其中所用粗尿激素液应具有2,000─50,000I﹒U﹒/ml溶液(最好为3,000─5,000I﹒U﹒尿激素/m1溶液)之浓度及200─2,000I,U﹒尿激素/mg蛋白质(宜为300─1,000I﹒U﹒尿激素/mg蛋白质)之纯度。4﹒一种根据请求专利部份第1和2项之方法,其中多乳固体基质系树脂基于多醣、纤维素、琼指糖例如瑞典PharmaciaAB出品之Sepha─roseR者,并且其中aprotin─in系藉共价键或直接或经由赋键剂(bendimpartingagent)或spacer结合于固体基质上,而后者系EACA(6─氨基己酸)者,又其中固体基质业经例如BrCN活化。5﹒一种根据请求专利部份第1和2项之方法,其中组尿激素液例如可藉NaCl、KCl或其他类之添加而将之调节至0﹒5─1m之总浓度;又在以亲合性层析分离法实际吸附尿激素前,柱内所充之吸附剂可藉用pH6─9及总浓度为0﹒5─1m之液体介质调理之,此等缓冲物系例如:磷酸混合物或tris─缓冲液及例如NaCl、KCl者。6﹒一种根据请求专利部份第1和2项之方法,其中在以aprotinin使尿激素吸附于表面经活性之固体基质上后及进行溶洗前,柱可接受0﹒5─1mNaCl液之中间清洗以自分离柱中除去不希之蛋白质,上述之中间清洗可继续进行以迄清洗剂不旋光;并且溶洗可用pH2─4﹒5及浓度为0,5─1m之溶洗液例如NaCl、KCl等者行之,而pH可以乙酸,HCl或者他化合物调节之;再者,溶洗助剂,诸如:氨基酸例如离氨酸,阿金氨酸者可加入至溶洗液内。
地址 9, AHAD HA'AM, TEL AVIV, ISRAEL.