| 摘要 |
La présente invention se rapporte à un procédé pour effectuer l'amplification, facilitée par une protéine RecA, d'une séquence cible d'ADN bicaténaire possédant des premier et second brins complémentaires, chaque brin comportant des extrémités 5' et 3'. Ce procédé consiste à complexer une amorce complémentaire d'une région terminale 5' du premier brin, et une amorce complémentaire d'une région terminale 5' du second brin avec la protéine RecA et en présence d'ATP-gamma-S. Les amorces complexées sont amenées à réagir dans un mélange contenant aussi la séquence cible, les quatre dNTP, la protéine RecA et la polymérase d'ADN. La réaction se fait à une température inférieure à celle requise pour la dissociation thermique des deux brins cibles, et se poursuit jusqu'à ce qu'un degré d'amplification souhaité de la séquence cible soit atteint. La présente invention comprend en outre le clonage et l'identification des séquences codant pour la protéine RecA de Thermus aquaticus. |
