一种抗骨增生片的定性定量检测方法

摘要

本发明公开了一种抗骨增生片的定性定量检测方法，增加了：（1）采用薄层色谱法，以柚皮苷为对照，鉴别抗骨增生片中含有骨碎补；以鸡血藤对照药材为对照，鉴别抗骨增生片中含有鸡血藤；以淫羊藿苷为对照，鉴别抗骨增生片中含有淫羊藿；（2）采用高效液相色谱法测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量。与现有技术相比，本发明方法，既增加了定性鉴别方法又增加了有效成份的含量测定方法，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制水平，确保了人们用药的安全性和有效性。本发明的抗骨增生片的定性定量检测方法，既可以用于控制抗骨增生片的质量，又可以用来控制相同处方的其他剂型如胶囊、颗粒、丸剂等剂型的质量。

主权项

一种抗骨增生片的定性定量检测方法，包括鸡血藤的显微鉴别，其特征在于还包括：①薄层色谱法，以柚皮苷为对照，鉴别抗骨增生片中含有骨碎补；以鸡血藤对照药材为对照，鉴别抗骨增生片中含有鸡血藤；以淫羊藿苷为对照，鉴别抗骨增生片中含有淫羊藿；②采用高效液相色谱法测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量，所述定性定量检测方法包括如下步骤：(1)取本品，置显微镜下观察：石细胞圆形或椭圆形、长方形或多角形，壁厚，胞腔含橙红色或棕色物；(2)取本品20片，研细，加沸程为60～90℃的石油醚30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液备用；残渣加乙酸乙酯50ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取淫羊藿苷和柚皮苷对照品，分别加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯‑丁酮‑甲醇‑水＝10∶1∶1∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取步骤(2)项下石油醚提取液，挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取鸡血藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录ⅥB的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以沸程为30～60℃的石油醚‑乙酸乙酯＝19∶5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(4)含量测定：照中国药典2010年版一部附录ⅥD的高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈‑0.1％甲酸溶液＝28∶72为流动相；检测波长为270nm；流速为0.8mL/min；柱温30℃；理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备：取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加70％乙醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品10片，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，超声功率300W，超声频率40kHz，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每片含淫羊藿以淫羊藿苷C₃₃H₄₀O₁₅计不得少于0.34mg。