一种高通量核酸分析方法及其应用

摘要

本发明涉及一种高通量基因分析方法及其应用，具体地，包括步骤：对于待分析的n种目的核酸片段，针对每个目的核酸片段，提供结合于所述目的核酸片段的不同结合区的至少2个特异探针，所述的各特异探针具有特异结合区和通用序列区，并且所述的特异结合区的序列与目的核酸片段的结合区的序列互补，而所述通用序列区的序列对应于高通量单分子或单分子扩增簇测序平台的测序引物序列，其中n为≥40的正整数；将含待分析的目的核酸片段的核酸样本与所述探针杂交，并连接所述探针，从而获得探针连接产物的混合物；用所述测序引物对探针连接产物混合物或其扩增产物进行测序，并进行分析，从而实现高通量目的基因片段的定量分析的目的。

主权项

一种非诊断目的的高通量核酸分析方法，其特征在于，包括步骤：(1)对于待分析的n种目的核酸片段，针对每个目的核酸片段，提供结合于所述目的核酸片段的不同结合区的至少2个特异探针，所述的各特异探针具有特异结合区和通用序列区，并且所述的特异结合区的序列与目的核酸片段的结合区的序列互补，而所述通用序列区的序列对应于测序引物的序列，其中n为≥40的正整数；(2)将含有待分析的目的核酸片段的核酸样本与步骤(1)所述的探针杂交，并连接所述探针，从而获得探针连接产物的混合物，其中各探针连接产物的3’和5’端都是序列对应于测序引物序列的通用序列区；(3)对步骤(2)的探针连接产物的混合物进行测序，和/或分析，从而获得目的核酸的信息；其中，每个目的核酸片段对应的2个探针为：5’端探针和3’端探针，所述的5’端探针能够与位于待分析的目的核酸片段3’端的结合区互补，所述的3’端探针能够与位于待分析的目的核酸片段5’端的结合区互补，并且所述的3’端探针的3’端和5’端探针的5’端进行抗核酸外切酶的修饰保护；并且，在所述步骤(2)中，进行多次变性‑复性‑连接循环。