一种小球藻生物化改性尺寸可控活性玻璃粉体的制备方法

摘要

本发明涉及一种小球藻生物化改性尺寸可控活性玻璃粉体的制备方法，属于活性玻璃粉体制备技术领域。本发明针对现有的制备的生物活性玻璃粉体由于组成多元化，导致其尺寸稳定性和分散性无法控制的问题，提供了一种通过将粉体制备并分散，通过将营养液与粉体分散液复合，使营养液成分吸附至粉体表面，随后将单细胞小球藻接种并培养，使其均匀覆盖至粉体表面，通过小球藻对营养成分的吸收，使粉体不发生团聚和凝结，随后富氧煅烧去除炭化小球藻，即可制备得一种尺寸可控活性玻璃粉体，本发明制备的活性粉体尺寸均一可控，制备的纳米纤维膜可有效促进细胞生长与增殖，且制备过程简单，绿色安全无污染。

主权项

一种小球藻生物化改性尺寸可控活性玻璃粉体的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）按重量份数计，分别称量55～60份无水乙醇、10～15份去离子水、10～15份质量分数10%氨水溶液和8～10份硝酸钙置于三角烧瓶中，搅拌混合并滴加质量浓度15%氨水溶液，调节pH至8.5～9.0，随后静置25～30min，对三口烧瓶添加去离子水质量相同的正硅酸乙酯，搅拌混合并静置沉淀，随后过滤并收集滤渣，用冰醋酸溶液滴加至三口烧瓶中，调节pH至7.0，随后再在200～300W下超声分散10～15min，制备得粉体分散液，备用；（2）按重量份数计，选取20～65份葡萄糖、5～15份蛋白胨、15～20份氯化钠和20～45份琼脂，搅拌混合形成培养基，加入去离子水稀释pH为7.0，随后将其置于115～120℃下灭菌10～20min，制得固体小球藻培养基，将小球藻接种至小球藻培养基中，在25～27℃下培养3～5天，制备得成熟小球藻，备用；（3）分别称取0.25～0.28g柠檬酸、0.25～0.28g柠檬酸铁铵、0.2～0.3gKH₂PO₄、1.5～1.8g氯化钙、45～50g葡萄糖和225～230mL去离子水置于烧杯中，搅拌混合并置于110～120℃下油浴加热15～20min，制备得无菌营养液；（4）按体积比1:3，将步骤（1）制备的粉体分散液与上述制备的无菌营养液搅拌混合，随后按接种量10%，将步骤（2）培养的成熟小球藻接种至上述制备的磷酸钙营养分散液中，在摇床转速为120～150r/min、温度25℃下振荡培养5～7天；（5）待培养完成后，过滤并收集滤饼，将其置于550～600℃管式炉中，在氧气气氛下，保温煅烧1～2h，随后静置冷却至室温，即可制备的一种小球藻生物化改性尺寸可控活性玻璃粉体。