一种软骨细胞无血清培养基及其制备方法

摘要

本发明涉及体外组织细胞分离技术领域，具体涉及一种软骨细胞无血清培养基，由基础培养基、血清替代物以及生长因子组成，不仅解决了现有技术中的血清培养基带来的问题，而且软骨细胞生长过程中很好的贴壁并增值速度更快，有利于获得更多细胞量，同时在软骨细胞增殖的同时能够保持软骨细胞的特性，未出现明显的去分化现象。

主权项

一种软骨细胞无血清培养基，由基础培养基、血清替代物以及生长因子组成，其中：所述基础培养基为DMEM培养基、F12培养基或者二者的混合物；所述血清替代物包括：葡聚糖5‑20g/L、脂类浓缩剂0.1‑1ml/L、丙酮酸钠50‑100mg/L、三碘甲状腺氨酸0.01‑2uM、氢化可的松0.05‑5mg/L、地塞米松0.1‑10ug/L、亚硒酸钠1‑5ug/L、β‑巯基乙醇25‑50uM、维生素C10‑100mg/L、谷氨酰胺50‑500ug/ml、转铁蛋白1‑20mg/L、胰岛素或胰岛素样生长因子5‑100ug/L、生长激素10‑200ug/L、孕酮5‑20nM、丁二胺20‑100uM、氯化胆碱2.5‑3.2mg/L、层粘连蛋白5‑30ug/L、大豆蛋白酶抑制剂2‑10mg/L；L‑精氨酸250.0‑320.0mg/L、L‑门冬氨酸12.00‑25.00mg/L、L‑谷氨酸15.0‑25.0mg/L、甘氨酸8.0‑12.0mg/L、L‑组氨酸13.0‑16.0mg/L、L‑羟脯氨酸18.0‑22.0mg/L、L‑异亮氨酸35.0‑55.0mg/L、L‑亮氨酸40.0‑60.0mg/L、L‑甲硫氨酸12.0‑18.0mg/L、L‑苯丙氨酸12.0‑18.0mg/L、L‑脯氨酸18.0‑22.0mg/L、L‑丝氨酸25.0‑32.0mg/L、L‑苏氨酸18.0‑22.0mg/L、L‑色氨酸2.0‑6.0mg/L、L‑酪氨酸20.19‑25.89mg/L、L‑缬氨酸18.0‑22.0mg/L；所述生长因子包括：碱性成纤维生长因子5‑60ug/L、表皮生长因子0.5‑30ug/L、转化生长因子1‑25ug/L、骨形成蛋白1‑20ug/L、血小板衍生生长因子1‑18ug/L、bHLH转录因子0.2‑5ug/L、转录因子E2F‑1 0.01‑2ug/L。