一种利用LRK1基因转化提高水稻籼粳杂种育性的方法

摘要

本发明属于转基因技术领域，涉及一种利用LRK1基因转化提高水稻籼粳杂种育性的方法；该方法利用基因枪微弹轰击法，将水稻LRK1基因转化籼稻愈伤组织，经过恢复培养获得表达LRK1基因的水稻植株。实验结果显示，所述的LRK1基因能成功转化水稻与粳稻品种日本晴、秋光等分别杂交，其F₁代结实率分别大幅度高于对照，达到经常品种的结实率水平。本发明的水稻LRK1基因及其同源基因转化水稻，使其具有广亲和性，能克服籼粳杂交不育特性。本发明为水稻籼粳亚种间杂种优势的利用提供了一种低成本、高效益的新方法。

主权项

一种利用LRK1基因转化提高水稻籼粳杂种育性的方法，其特征在于，利用基因枪微弹轰击法，将水稻LRK1基因转化水稻愈伤组织，经过恢复培养获得表达LRK1基因的水稻植株；其包括步骤：(1)将LRK1基因编码序列插入植物表达载体构建重组表达载体；(2)诱导处理水稻9311愈伤组织；(3)用步骤(1)所得的重组表达载体转化水稻9311愈伤组织；(4)恢复培养步骤(3)所得的水稻9311愈伤组织；(5)筛选含有lrk1基因的9311愈伤组织，将其置于分化培养基上光照培养，再转入生根壮苗培养基，长大后移入温室，得到LRK1转基因的9311水稻苗；(6)将LRK1基因转化处理的试管苗移载田间，并在分蘖期取叶片提取DNA采用PCR扩放技术进行分子检测，获得阳性T₀代，加代繁殖后获得转基因9311的T₁‑ T₄代株系；(7)种植LRK1转基因9311的T₄代株系、对照9311、日本晴及秋光，抽穗期间利用LRK1转基因9311的T₄代株系、对照9311分别与日本晴及秋光杂交，得到杂交种，种植杂交种，成熟期考查每个杂交组合的结实率；每个组合调查10株主茎穗的结实率；所述的LRK1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。