一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞凋亡影响的方法

摘要

本发明公开一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞凋亡影响的方法，包括以下步骤：(1)将待测的所述胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(2)将冷冻的胶基型烟草制品立即用粉碎机将其粉碎；(3)再次将碎末胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(4)将碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡；(5)将提取液离心分离；(6)用渗透压测定仪测定上层清液，调节其渗透压与细胞培养基一致；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)培养人口腔黏膜上皮细胞作为检测对象；(9)将胶基型烟草制品提取液加入到培养好的人口腔黏膜上皮细胞中；(10)经过不超过于24小时的培育后，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。

主权项

一种检测胶基型烟草制品对人口腔细胞凋亡影响的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将待测的所述胶基型烟草制品置于液氮中冷冻20‑40min；(2)将步骤(1)冷冻的所述胶基型烟草制品，立即用粉碎机将其粉碎，收集粉碎后的碎末胶基型烟草制品；(3)再次将所述碎末胶基型烟草制品置于液氮中冷冻；(4)将步骤(3)得到的所述碎末胶基型烟草制品用人工唾液浸泡20‑40min，每隔2‑5min搅动一次；所述人工唾液的温度为36‑38℃；(5)将步骤(4)得到的提取液离心分离5‑10min；(6)用渗透压测定仪测定步骤(5)得到的上层清液，调节其渗透压与细胞培养基一致，得到胶基型烟草制品提取液；(7)测定提取液中的烟碱含量；(8)培养人口腔黏膜上皮细胞作为检测对象；(9)将步骤(6)中获得的胶基型烟草制品提取液加入到步骤(8)中培养好的人口腔黏膜上皮细胞中；(10)经过不超过于24小时的培育后，用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。