人尿中对羟基苯甲酸酯类防腐剂浓度的UPLC‑MS/MS检测方法

摘要

本发明提供人尿中对羟基苯甲酸酯类防腐剂浓度的UPLC‑MS/MS检测方法，包括以下步骤：(1）样品处理：取待测尿液样品于试管或离心管中，加样1/10倍体积的水，然后加入β‑葡糖糖苷酸酶，摇匀并密封，放入37℃水浴中加热至反应完全，取一定量的反应液，加入3倍量的沉淀剂（甲醇/乙腈=1：1）沉淀蛋白，涡旋混匀后，15000rpm离心10min，取上清5‑10μL进行样分析；（2）进样，按照一定的条件进行UPLC‑MS/MS检测；（3）根据样品的峰面积和标准曲线的回归方程中，计算尿液中对羟基苯甲酸酯类防腐剂的浓度。本发明的有益效果是该方法简单快捷，灵敏度高，抗干扰能力强，适合尿液中防腐添加剂的同时定性定量检测，过量防腐剂的食品可通过代谢在尿中检出。

主权项

人尿中对羟基苯甲酸酯类防腐剂浓度的UPLC‑MS/MS检测方法，其特征在于：包括以下步骤：1)样品处理：取待测尿液样品于试管或离心管中，加样1/10倍体积的水，然后加入β‑葡糖糖苷酸酶，摇匀并密封，放入37℃水浴中加热至反应完全，取一定量的反应液，加入3倍量的沉淀剂(甲醇/乙腈＝1：1)沉淀蛋白，涡旋混匀后，15000rpm离心10min，取上清5‑10μL进样分析；2)HPLC‑MS/MS分析：将处理后的样品用三重四级杆液质联用仪，在以下条件下进行分析液相条件：流动相：A:0.1％甲酸水溶液，B:乙腈；流速：0.3ml/min；进样量：5μL；柱温：45℃；色谱柱：Waters ACQUITYBEH C18,1.7μm,2.1*50mm Column梯度洗脱程序Time/minA％B％09552.070305.060407.010908.010908.195510.0955质谱条件其他质谱参数：毛细管电压(kV):3.2kV；     源温度(℃):120；脱溶剂气温度(℃):350；     脱溶剂气流量(L/Hr):800；气帘气流量(L/Hr):50；      驻留时间(s)：0.1s3)根据样品的峰面积和标准曲线的回归方程中，计算尿液中对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的浓度。