一种脱除辣椒种子中辣椒轻斑驳病毒的方法

摘要

本发明涉及一种脱除辣椒种子中辣椒轻斑驳病毒的方法，属种子处理技术领域。具体通过以下步骤完成：（1）湿热处理，（2）药剂处理，（3）滤种，（4）漂洗，（5）烘干，（6）病毒检测。该方法克服了现有技术的不足，利用本发明提供的方法不仅提高了辣椒种子的发芽率及发芽势，而且对辣椒种子中辣椒轻斑驳病毒的脱除更为彻底，脱除率达到100%。另外本发明提供的一种可对脱毒效果进行评价的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法，能够精确掌握脱毒种子中病毒的含量，从而在保证种子高品质的前提下，准确控制钝化病毒的技术指标，做到最大限度地抑制病毒活性。本发明提供的辣椒种子脱毒方法不受时间限制、环境的影响，可常年在实验室或基层单位使用，非常实用，可用于脱毒辣椒种子的规模化生产。

主权项

一种脱除辣椒种子中辣椒轻斑驳病毒的方法，其特征在于通过以下步骤实现：（1）湿热处理：将辣椒种子浸泡于5倍体积的沸水中，并迅速震荡冷却至40‑45 ℃，滤干水溶液；（2）药剂处理：在滤干水溶液的辣椒种子中加入5倍体积的10%Na₃PO₄溶液，浸泡35 min；（3）滤种：药剂处理结束后，过滤种子，滤去10%Na₃PO₄溶液；（4）漂洗：用无菌水清洗辣椒种子3‑5次，滤干无菌水；（5）烘干：及时将步骤4中得到的种子放于网架上置于烘箱内，40 ℃处理72 h，防止种子发芽及霉变；（6）病毒检测：利用TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法对步骤5获得的种子进行病毒检测，并根据PCR扩增曲线Ct值和标准曲线方程即可对辣椒种子中的辣椒轻斑驳病毒进行精确定量，计算脱毒率。