生产次丹参酮二烯的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了生产次丹参酮二烯的酿酒酵母基因工程菌及其构建方法与应用。本发明所提供的基因工程菌是按照包括以下步骤的方法构建的：在出发酿酒酵母中引入外源的丹参柯巴基焦磷酸合酶基因(SmCPS)和丹参次丹参酮二烯合酶基因(SmKSL)得到生产次丹参酮二烯的重组酿酒酵母，记作重组酿酒酵母ZD‑T‑000和ZD‑T‑010。在此基础上，提高3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶、萜类调控因子蛋白UPC2、牻牛儿牻牛儿基焦磷酸合酶、法呢基焦磷酸合酶中的一种或几种蛋白的活性，构建得到24株(ZD‑T‑001～ZD‑T‑008，ZD‑T‑011～ZD‑T‑018，ZD‑T‑021～ZD‑T‑028)高产次丹参酮二烯的重组酿酒酵母菌株。本发明所构建的酿酒酵母ZD‑Tans‑001在好养氧条件下，发酵6天时可生产487.91mg/L的次丹参酮二烯。

主权项

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ZD‑Tans‑001，其保藏号为CGMCC No.5296。