大肠杆菌工程菌及其催化马来酸合成富马酸的方法

摘要

本发明涉及一种可高产富马酸的大肠杆菌工程菌，通过敲除大肠杆菌的延胡索酸酶编码基因fumA和fumC，并转化来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶基因得到。本发明还公开了上述大肠杆菌工程菌催化马来酸合成富马酸的方法：发酵培养大肠杆菌工程菌，当OD₆₀₀达到40‑80时对大肠杆菌工程菌进行高密度诱导表达，将得到的发酵液生化催化马来酸，得到富马酸。本发明利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌中的fumA和fumC基因，切断其富马酸到L‑苹果酸的代谢通路，然后表达来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶，获得的基因工程菌株可高效转化马来酸底物合成高纯度富马酸，几乎不合成L‑苹果酸副产物，为全细胞法催化马来酸生产富马酸的工业化提供依据。

主权项

一种可高产富马酸的大肠杆菌工程菌，其特征在于：所述工程菌通过敲除大肠杆菌的延胡索酸酶编码基因，并在所得的重组菌株中表达马来酸顺反异构酶基因得到。