功能化修饰的碳纳米管在抗卵巢肿瘤中的热消融作用

摘要

本发明涉及肿瘤靶向功能化碳纳米管及其制备。多药耐药基因及其所编码的细胞膜P糖蛋白(P‑gp)是影响卵巢癌化疗效果的一大障碍。目前仍然没有杀伤耐药癌细胞的有效方法。碳纳米管(CNTs)在近红外光区有较强的吸收热能的特点，并能快速释放能量，形成局部热效应。本发明设计以P‑gp为靶点，通过修饰，增加耐药癌细胞中碳纳米管的蓄积，利用近红外线光辐射，形成胞内高温状态而使得细胞破坏，以达到杀灭癌细胞。

主权项

功能化修饰的碳纳米管的制备方法，其特征在于：(1).CNTs的制备与纯化；自制多壁碳纳米管，管径25nm左右，采用混酸氧化的方法纯化cNTs，即将0.3g未纯化的碳纳米管加入到24mL体积比为3∶1的浓硫酸和浓硝酸混合液中，超声振荡8小时，再通过抽滤并用去离子水反复冲洗，使滤液pH值至中性，将抽滤得到的碳纳米管置于80℃的恒温箱中烘干，干燥完全后将其研磨成粉末，即得到纯化后的碳纳米管样品；(2).CNTs的修饰，利用DSPE‑PEG(2000)‑biotin修饰，形成B‑CNTS；按照配比将CNTs与DSPE‑PEG(2000)‑biotin溶液加入到干燥的烧瓶中，超声分散，混合物在室温下搅拌，产物反复洗后离心，得到B‑CNTS；(3).抗P‑gb单抗的修饰，利用neutralite avidin(NA)修饰，形成抗P‑gp‑NA(mAb‑NA)；商业化的P‑gb单抗和neutralite avidin进行纯化，10mg的单抗与Traut反应液共培养1小时，再加入10mg NA，最后用MBS液终止，通过电泳胶纯化；(4).制备抗Pgp‑NA‑B‑CNTs(mAb‑CNTs)复合物；将B‑CNTs和mAb‑NA进行1∶2(wt/wt)混合，室温下震荡35min，然后进行离心，沉淀物用PBS溶解，得到mAb‑CNTs复合体。