主权项 |
一种刨花润楠的组培繁殖方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体采集与处理:选取生长健壮、树型圆满、无病虫害,树高10m以上的刨花润楠为采种母树,种子采集后,清水浸泡2~3d,搓掉外种皮,冲洗干净后,挑选出种实饱满,无病虫害的种子,用1000mg/L的GA<sub>3</sub>溶液浸泡种子60min;(2)外植体表面消毒:在超净工作台上先将刨花润楠种子小心剥去膜质内种皮,注意不要伤及种胚,加入0.1%升汞溶液,浸泡12min,其间不断摇动,倒掉升汞溶液用无菌水冲洗5~6次;(3)芽诱导:将消毒好的种子接种到芽诱导培养基进行培养,每瓶接种一粒种子;5~7d之后,胚开始萌动;(4)丛芽增殖:将步骤(3)萌发后培养25~30d的芽切下,切为2~3cm茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养;首先将茎段在添加AgNO<sub>3</sub> 0.5~2.0mg/L的增殖培养基中预培养10d,然后转接到不含AgNO<sub>3</sub>的增殖培养基中培养30d,诱导不定芽,形成新芽丛;(5)生根培养:步骤(4)得到的增殖芽丛中芽高超过2cm的嫩茎切下,接入生根培养基;(6)生根苗移栽:将生根培养20d的生根瓶苗移到温室中适应外界环境5~7d,然后将组培瓶盖从半开到全开炼苗1d,将组培苗小心取出,洗净粘于根上的培养基,移栽到泥炭土:珍珠岩=3:1混合基质上,移栽后前20d采用盖膜保湿,然后揭开薄膜按常规幼苗管理。 |