等位基因的偏向扩增

摘要

提供了分析核酸的方法。在一种示范性方法中，采用等位基因偏向扩增法优先扩增靶核酸的低含量等位基因。

主权项

一种扩增和检测生物样品中等位基因的方法，所述方法用于非诊断目的，其中所述生物样品包含靶核酸的第一等位基因和第二等位基因，存在的第一等位基因浓度高于第二等位基因，该方法包括以下步骤：在生物样品中加入热稳定性聚合酶、探针和为扩增生物样品中靶核酸设置的引物对，其中设置的探针与靶核酸杂交而不被延伸，所述探针与第一等位基因杂交时具有第一Tm，与第二等位基因杂交时具有第二Tm，其中第一Tm高于第二Tm，并且所述探针在结合第一等位基因时是匹配的而在结合第二等位基因时是错配的，通过在变性温度和退火温度之间热循环扩增生物样品中的靶核酸，其中所述热循环包括在变性温度和退火温度之间至少4.0℃的温度变化速率，且退火温度低于第一Tm使得退火温度下探针与第一等位基因杂交并抑制第一等位基因的扩增且第二等位基因被优先扩增，以及通过对探针与所扩增的第二等位基因的解链曲线分析来检测所扩增的第二等位基因。