用于定点基因组修饰的组合物和方法

摘要

本公开提供新型玉米、番茄和大豆U6、U3、U2、U5和7SL snRNA启动子，所述启动子用于植物中的CRISPR/Cas介导的靶向基因修饰。本公开还提供使用U6、U3、U2、U5和7SL启动子驱动sgRNA多核苷酸的表达的方法，其于植物中的靶向基因修饰的CRISPR/Cas系统中发挥作用。本公开还提供将平末端DNA片段插入基因组切割位点的基因组修饰方法。

主权项

一种包含snRNA启动子的重组DNA构建体，所述snRNA启动子选自由以下组成的组：U6启动子、U3启动子、U2启动子、U5启动子和7SL启动子；所述启动子可操作地连接至编码单向导RNA(sgRNA)的序列，其中所述snRNA启动子的序列包含SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:146‑149、SEQ ID NO:160‑201或SEQ ID NO:247‑283；或其片段，其中所述片段的长度为至少140bp。