新型基因打靶方法

摘要

本发明提供一种新型的基因打靶方法以及用于所述方法的核苷酸构建物，所述方法将含干扰基因的核苷酸构建物通过同源重组整合在不依赖于基因的有效基因打靶区域，从而提高基因，尤其是难于打靶的基因的打靶效率。本发明还提供了用于基因表达调控和基因破坏的基因打靶系统，本发明方法可调控或修饰生物体的任何基因。本发明方法利用所有机体细胞中内源性的同源重组过程，因此，可以修饰机体的任何基因。

主权项

一种用于调控基因的核苷酸构建物，其结构如下式所示：5’‑A‑B‑C‑3’其中，A是5’同源序列，B是干扰基因，C是3’同源序列；所述5’和3’同源序列使得所述核苷酸构建物的重组位点位于该待调控基因的起始密码子的第一个核苷酸到该待调控基因的起始密码子的第一个核苷酸上游的110，优选50个核苷酸之间，或者所述5’和3’同源序列使得所述核苷酸构建物的重组位点位于该待调控基因的终止密码子的第一个核苷酸上游的100、50或20个核苷酸，优选50个核苷酸到该待调控基因的终止密码子的第一个核苷酸下游的300个核苷酸。