一种建兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物及其检测方法

摘要

本发明提供一种建兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物及其检测方法，所述引物为：外引物F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，外引物B3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；内引物FIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，内引物BIP的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；方法如下：以建兰花叶病毒的CP基因序列为靶标基因设计引物，得到针对6个区域的4条特异性引物，应用DNA链置换聚合酶,在恒温条件下应用该特异性引物对靶基因进行RT‑LAMP扩增，最后将反应产物进行1％琼脂糖凝胶电泳分析，DNA荧光染料检测、酶切验证和克隆测序比对。本发明针对建兰花叶病毒建立的环介导等温扩增技术具有扩增快速高效、特异性好、操作简便、不需要特殊仪器等优点，有较高的应用价值，在基层和现场检测中有很好的应用前景。

主权项

一种建兰花叶病毒RT‑LAMP检测引物，其特征在于：应用该4条引物对靶标的6个区域进行扩增，所述4条引物具体如下：外引物F3:5'‑TGGTTTCCAGGAGGATACCC‑3'；外引物B3：5'‑AAGATGGCCCTTGGTGACCT‑3'；内引物FIP:5'‑ATTCAGCAGGCTCCAGCGCGGCA‑gaattc‑CCGCCTTTGACTTCTTCGATGC‑3'；内引物BIP:5'‑AAGTACGGCGCCCTTGCCCGT‑gaattc‑GTGATGAGGTTGCCGTTTTGGA‑3'。