发明名称 |
一种胎盘组织超低温冷冻保存方法 |
摘要 |
本发明公开一种胎盘组织超低温冷冻保存方法,包括下述步骤:取胎盘组织,离体后置于4℃的含双抗的0.9%生理盐水中保存,先剪成单个胎盘小叶组织块,然后粉碎成组织块;取上述胎盘组织块,按照1:1.2体积比加入保护液;加入保护液后,再用体积分数为10‑20%的专用培养基于4℃培养45‑60min;然后再在4℃,2500rpm离心5‑10min,弃上清液;然后向离心后组织块中加入体积分数为85‑95%冻存液2.5ml,将组织块浸没其中,按一定温降速率降温至‑100℃,最后转移至液氮中保存。本发明通过保护液与冻存液协同保护细胞的活性,防止细胞形成冰晶受到损伤,确保了复苏后的胎盘组织活性,能大幅度减少多肽等活性物质在冷冻过程中的损害。 |
申请公布号 |
CN106172375A |
申请公布日期 |
2016.12.07 |
申请号 |
CN201610570527.7 |
申请日期 |
2016.07.19 |
申请人 |
安徽惠恩生物科技股份有限公司 |
发明人 |
张正亮 |
分类号 |
A01N1/02(2006.01)I |
主分类号 |
A01N1/02(2006.01)I |
代理机构 |
北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 |
代理人 |
胡剑辉;韩立峰 |
主权项 |
一种胎盘组织超低温冷冻保存方法,其特征在于,该保存方法包括下述步骤:取胎盘组织,离体后置于4℃的含双抗的0.9%生理盐水中保存,先剪成单个胎盘小叶组织块,然后粉碎成组织块;取上述胎盘组织块,按照1:1.2体积比加入保护液;加入保护液后,再用体积分数为10‑20%的专用培养基于4℃培养45‑60min;然后再在4℃,2500rpm离心5‑10min,弃上清液;然后向离心后组织块中加入体积分数为85‑95%冻存液2.5ml,将组织块浸没其中,按一定温降速率降温至‑100℃,最后转移至液氮中保存。 |
地址 |
230000 安徽省合肥市高新区潜水东路7号401室 |