一种自体皮肤成纤维细胞用于美容抗衰的制备方法

摘要

本发明公开一种自体皮肤成纤维细胞用于美容抗衰的制备方法，包括下述步骤：切取人自体腹部皮肤，置于含有氨苄青霉素和硫酸链霉素的PBS中漂洗，加入含有胶原酶、透明质酸酶的DMEM中，放置过夜；加入含有胰酶和EDTA的PBS消化液，离心收集细胞，用DMEM洗脱后开放培育；按一定比例传代培养，制成细胞悬液；取细胞悬液移入离心管中，离心提取自体皮肤成纤维细胞；向自体皮肤成纤维细胞中加入多种因子制得混合物，用于美容抗衰。本发明利用自体皮肤成纤维细胞的生物学作用，并添加了一些营养因子，在生物学有效期内更好储存及时使用，将对皮肤产生最佳的修复、再生、填充、祛斑和抗氧化等美容作用。

主权项

一种自体皮肤成纤维细胞用于美容抗衰的制备方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：1)切取人自体腹部皮肤，置于含有氨苄青霉素和硫酸链霉素的PBS中漂洗，将漂洗后皮肤剪成小块，加入含有胶原酶、透明质酸酶的DMEM中，放置过夜；2)加入含有胰酶和EDTA的PBS消化液，离心收集细胞，用DMEM洗脱后开放培育；待培育的细胞长成单层后，用无钙镁离子的PBS漂洗，再次加入含有胰酶和EDTA的PBS消化液消化，然后加入含有人自体血清的α‑MEM培养液吹打终止消化，按一定比例传代培养，制成细胞悬液；取细胞悬液移入离心管中，离心提取自体皮肤成纤维细胞；3)向自体皮肤成纤维细胞中加入成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、I型胶原蛋白、肝细胞生长因子、角质细胞生长因子、γ‑氨基丁酸、维生素b12制得混合物，用于美容抗衰。