一种抗体偶联药物的阳离子交换层析纯化方法

摘要

本发明提供了一种抗体偶联药物（ADC）的阳离子交换层析纯化方法，所述阳离子交换层析可选用结合‑洗脱模式或过载模式进行纯化，可将ADC药物的偶联比（DAR）控制在目标工艺范围内，同时起到去除多聚体的作用。这是一种新的ADC制备纯化工艺，可降低生产的成本和风险，同时实现对ADC药物的小分子/抗体的摩尔偶联比（DAR）和多聚体的控制，有助于开发可控性更强、成本和风险更低的ADC生产工艺，以获得质量更高的产品，保证用药安全和治疗效果。

主权项

一种抗体偶联药物的阳离子交换层析纯化方法，其特征在于，利用阳离子交换层析来纯化抗体偶联药物，控制小分子/抗体偶联比（DAR）和多聚体，所述纯化方法包括以下步骤：调节ADC样品及平衡缓冲液至pH 4‑7、电导2‑8 mS/cm，选用结合‑洗脱模式或过载模式进行纯化；所述的抗体偶联药物由小分子毒素通过接头与抗体偶联构成，其中偶联比（DAR）为2‑5；所述的过载模式上样量不低于300 mg/mL介质；所述的过载模式的过程包括：平衡缓冲液平衡层析介质，然后进行抗体偶联药物上样，待ADC样品吸附饱和继而开始流穿后，收集目标蛋白流穿液，杂质多聚体以及DAR值偏高的蛋白质则吸附在层析柱上；所述的结合‑洗脱模式上样量不超过层析介质实际动态载量的90%；所述的结合‑洗脱模式的过程包括：平衡缓冲液平衡层析介质，然后进行抗体偶联药物上样，并用pH 4‑7、电导10‑30 mS/cm的洗脱缓冲液对结合的ADC抗体进行梯度洗脱，收集目标蛋白洗脱液，而杂质多聚体以及DAR值偏高的蛋白质则在其后洗脱出来；所述的阳离子交换层析介质选自Eshmuno CPX、POROS HS、POROS XS、Toyopearl Gigacap S‑650M、Toyopearl SP‑650M、Nuvia HR‑S和SP Sepharose。