一种3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸的制备方法及其制备用酶

摘要

本发明涉及一种利用生物酶催化技术制备3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸的方法及其制备用7α‑类固醇脱氢酶。该方法以鹅去氧胆酸为底物，在NAD、乳酸脱氢酶、丙酮酸钠以及缓冲溶液存在的条件下，用7α‑类固醇脱氢酶催化鹅去氧胆酸制备3α‑羟基‑7氧代‑5β胆烷酸，其中7α‑类固醇脱氢酶来源于羊种布鲁氏菌Brucella melitensis。该方法操作简单、反应条件温和易控、反应时间短、对底物的转化率高达99.8%以上，所获得的产品的含量在96.8%以上。

主权项

一种3α‑羟基‑7氧代‑5β‑胆烷酸的制备方法，其特征在于：以鹅去氧胆酸为底物，在NAD、乳酸脱氢酶、丙酮酸钠以及缓冲溶液存在的条件下，用7α‑类固醇脱氢酶催化鹅去氧胆酸制备3α‑羟基‑7氧代‑5β胆烷酸，所述7α‑类固醇脱氢酶来源于羊种布鲁氏菌Brucella melitensis，所述乳酸脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，在整个催化反应体系中，所述底物的浓度为50～100mg/mL，所述NAD的浓度为0.01～0.25mg/mL，所述丙酮酸钠的浓度为10～30mg/mL。