具有条件活性的抗表皮生长因子受体抗体及其使用方法

摘要

本发明提供了修饰的抗‑EGFR抗体及编码修饰的抗‑EGFR抗体的核酸分子。本发明还提供了使用抗‑EGFR抗体的治疗方法和应用。

主权项

修饰的抗‑EGFR抗体，或者其抗原结合片段，其包含在未修饰的抗体的可变重链中在对应于位置104的位置用天冬氨酸的置换(Y104D)，其中：所述修饰的抗‑EGFR抗体或其抗原结合片段包含可变重链(VH)和可变轻链(VL)或其部分，所述其部分足以与EGFR抗原结合，从而单独所述VH或VH和VL这两者是修饰的；所述其部分足以形成抗原结合位点及含有所述Y104D氨基酸置换；通过将抗体的VH链与SEQ ID NO:3所示的VH链比对来鉴定对应的氨基酸位置；所述修饰的抗‑EGFR抗体，或者其抗原结合片段，特异性结合表皮生长因子受体(EGFR)或其可溶性片段，并且含有未修饰的抗体或其抗原结合片段中的多达1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11个氨基酸置换，包括Y104D；所述未修饰的抗‑EGFR抗体选自：i)西妥昔单抗，其包含(a)SEQ ID NO:3所示的可变重链及SEQ ID NO:4或10所示的可变轻链，或(b)SEQ ID NO:1所示的重链及SEQ ID NO:2所示的轻链，或其抗原结合片段；ii)抗体，其包含SEQ ID NO:8所示的重链及SEQ ID NO:9所示的轻链，或其抗原结合片段；和iii)Fab片段，其包含SEQ ID NO:5所示的重链及SEQ ID NO:2所示的轻链，或其抗原结合片段；和iv)i)、ii)或iii)的人源化形式；和所述修饰的抗‑EGFR抗体，或者其抗原结合片段，在肿瘤环境中具有条件活性，并且在肿瘤环境条件下和在非肿瘤环境条件下相比，呈现出与人表皮生长因子受体(EGFR)或者其可溶性片段的结合活性至少1.7的比率，其中：肿瘤环境条件包括6.0‑6.5的pH或者5mM‑20mM的乳酸盐浓度两者或两者之一，及10mg/mL‑50mg/mL的蛋白质浓度；和非肿瘤环境条件包括7.0‑7.8的pH或者0.5mM‑5mM的乳酸盐浓度两者或两者之一，及10mg/mL‑50mg/mL的蛋白质浓度。